发布网友 发布时间:2023-07-27 06:03
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热心网友 时间:2024-10-05 12:57
直接观察外泌体
全标本包埋外泌体
100,000 × g exosome沉淀 或 富集的冰冻外泌体
2% or 4% (w/v) PFA
PBS
1% 戊二醛
草酸双氧铀, pH 7
甲基纤维素-UA, pH 4: 9份2% 甲基纤维素 +1份4%乙酸双氧铀,用前混合
Formvar-carbon载样铜网
封口膜
5号镊子
玻璃培养皿
不锈钢环,比铜网略大
1号滤纸
铜网储存盒
透射电镜
Figure 1. TEM下exosome形态。箭头示exosome,三角形示脂质颗粒
Ref:
1: Current Protocols in Cell Biology
直接观察外泌体 全标本包埋外泌体 100,000 × g exosome沉淀 或 富集的冰冻外泌体 2% or 4% (w/v) PFA PBS 1% 戊二醛 草酸双氧铀, pH 7 甲基纤维素-UA, pH 4: 9份2% 甲基纤维素 +1份4%乙酸双氧铀,用前混合 Formvar-carbon载样铜网 封口膜 5号镊子 玻...
细菌 电镜 透射可以了解一下Nanosurf,Nanosurf成立于2013年,是瑞士的扫描探针显微镜制造商。我们的产品由我们经验丰富的工程师和物理学家团队在Liestal的总部开发和生产,并销往世界各地。产品范围包括紧凑的AFM,先进的科研用原子力显微镜系统,以及订制的...
外泌体小知识(一)其中,外泌体分离之后,需要经过一系列鉴定才能确定分离的是外泌体。鉴定方法从物理特征到表面分子标志物,多角度进行鉴定。(1)透射电镜鉴定法 :简称TEM,适合外泌体双层囊膜超微结构观察,即通常为茶托型或一侧凹陷的半球形。(2)纳米颗粒跟踪分析法 :简称NTA,该方法能保证外泌体原始状态、检...
这篇Cell 文章告诉你如何研究外泌体 miRNA首先,研究人员从肥胖小鼠的内脏脂肪组织中分离出脂肪组织巨噬细胞ATM,利用超速离心提取ATM细胞的外泌体,并通过电镜和NTA分析进行了进一步的纯化,以证实ATM细胞确实会分泌外泌体。接着,通过Transwell小室实验和外泌体跟踪技术,以及外泌体分泌阻断实验,证明外泌体具有转运能力,能够从供体细胞释放并被受...
外泌体是做什么的?外泌体(Exosomes)是一种双磷脂膜囊泡,含有蛋白、脂质及核酸等多种成分,是细胞外囊泡的一种。外泌体体积小,直径在40~200 nm,在透射电镜下具有典型的杯状结构。几乎所有的细胞都分泌外泌体,外泌体在细胞间的连接中发挥重要作用。01、外泌体的形成 细胞发生内吞后,内陷的细胞膜形成数个小囊...
如何辨别真假外泌体?2.检测方法:使用已知的外泌体特异性标记物(如CD63、CD81、ALIX等)进行检测。这些标记物在外泌体中广泛存在,因此可以有效地识别真核细胞来源的外泌体。此外,还可以通过电镜观察、流式细胞术等方法进一步验证外泌体的身份。3.价格:谨慎对待价格过低的产品。外泌体的提取和纯化过程复杂且成本高昂,...
外泌体还可以这样研究吗外泌体的提取主要包括以下几种方式。一是超速离心法,这是目前外泌体提取最常用的方法 。此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足,电镜鉴定时发现外泌体聚集成块, 由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准,也有一些研究认为此种 方法得到的是微泡不是外泌体 。二是过滤离心, 这种操作简单、省...
实战分享 | 外泌体提取之经验小结因此,在这里推荐给大家一个小贴士 就是在收集准备提取外泌体的条件培养基或者血清时,一定要提前做到低速离心和普通高速离心这一步,尤其是为了做透射电镜或者蛋白免疫印迹实验而提取的外泌体 ,一定要注意这一点。尽管过程比较费时,但是能生产出有用的结果才是更重要的。至于其他的外泌体提取方法,如...
外泌体提取策略外泌体的生物学价值和临床应用价值凸显了开发有效提取和分离外泌体技术的重要性和必要性。相信随着技术的不断进步和创新,外泌体提取将变得更加简便经济,纯度越来越高,完整性越来越好。提取后往往需要进一步检测,确定提取的是不是外泌体。有三种方法:1. 扫描电镜观察;2. NTA仪器粒径检测;3. WB检测。如图...
干货分享|大规模细胞培养上清外泌体富集实验技巧纯净细胞培养上清的采集与保存 在收集细胞培养上清时,低速离心去除杂质后,进行二次纯化,通过不同转速离心和合并上清,确保上清中含有纯净的外泌体。收集后立即冷冻保存,以保持外泌体活性和质量。外泌体提取与鉴定的艺术 天津舍为斯生物技术有限公司提供成熟的超速离心法和外泌体提取试剂盒服务。为了确保...
生物干货| 透射电镜之负染色技术负染制样通常通过悬滴法进行,步骤包括:先在载网上滴加生物样品,然后快速加入高电子密度染色剂如磷钨酸,染料形成包裹样品的外壳并干燥。在透射电镜下,高密度染色剂背景呈现暗色,样品由于电子密度低而显亮,形成鲜明对比。样本要求方面,液体样品需提供适量浓度,粉末样本需注明溶剂和比例,外泌体需干冰...