二抗IgG能检测它的亚型吗
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发布时间:2022-04-26 09:30
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时间:2022-06-26 19:25
如何选择正确的二抗?
以下指南将帮助您选择最适合该应用的二抗。
1. 一抗的宿主物种是什么?二抗指向一抗的物种。如果使用来源于兔的一抗,则需要来源于除兔以外的其它物种的抗兔二抗。例如山羊多克隆抗兔IgG - H L (HRP) 二抗 可以检测兔多克隆抗 Ki67 一抗 。
2. 需要了解哪些有关一抗同型的内容?二抗必须指向一抗同型。
多克隆一抗通常来源于兔、山羊、绵羊或驴,并且是IgG 同型。二抗通常为抗 IgG 重链和轻链的抗体。
单克隆一抗通常来源于小鼠、兔和大鼠。例如,如果单克隆一抗为小鼠 IgG1,则 需要抗小鼠 IgG 或特异性较低的 F(ab) 片段抗小鼠 IgG。
人免疫球蛋白类、亚类、型和亚型:
类或同型:IgG ( heavy chains), IgM ( ), IgA ( ), IgE (ε), IgD ( )
亚类: IgG1 ( 1 heavy chains), IgG2 ( 2), IgG3 ( 3), IgG4 ( 4); IgA1 ( 1), IgA2 ( 2)
型: light chain, light chain
亚型: 1, 2, 3, 4
其它类型的反应:
多价抗体与所有免疫球蛋白类反应
抗 Fc 或重链 ( , , ε, , and ) 抗体仅与重链反应
抗 F(ab) 或完整分子抗体与重链和轻链反应,而与免疫球蛋白类无关。
由于所有免疫球蛋白类均使用相同的 和 轻链,因此抗轻链( 和 )抗体 与所有免疫球蛋白类反应
3. 需要酶学或荧光检测吗?偶联类型是依赖于应用的。
对于酶学和生物素检测,例如,在 WB 或 ELISA 中,建议将二抗偶联于 HR[工业电器网-cnelc]P, AP 或 生物素。不论抗体宿主物种是什麽,抗生物素蛋白和链霉亲和素与生物素的结合 作用均很强,并且均能使信号放大。
如果使用了激光,例如,在流式细胞术、ICC/IF 或 IHC 中使用时,则建议将二抗偶 联于荧光染料进行荧光检测。访问我们 荧光染料指南,为您的实验选择染料。
4. 是否需要预吸附的二抗?对于富含免疫球蛋白的组织和细胞,通常推荐使用预吸附血清的二抗于蛋白质印 迹应用。预吸附的二抗与内源免疫球蛋白发生相互作用的可能性较低,因此可降 低非特异性背景。二抗进行预吸附时,预吸附样品应来源于与检测样品相同的物 种。例如,在人组织中检测时,将需要人预吸附抗体。
5. 是否需要亲和纯化的抗体或 IgG 片段?使用亲和纯化的抗体或 IgG 片段的优点将取决于预期的结合类型。亲和纯化的抗 体的非特异性结合量最低,而 IgG 片段包含高亲和抗体。事实上,在亲和纯化中, 高亲和力抗体保持固定在基质上并且不能被洗脱。
6.有必要使用 F(ab) 或 F(ab)2片段抗体吗?F(ab) ) 和 F(ab)2片段抗体消除了抗体 Fc 部分与细胞(如巨噬细胞、树突细胞、 中性粒细胞、NK 细胞和 B 细胞)上 Fc 受体之间的非特异性结合,并且由于它 们尺寸较小而能够更有效地渗透组织。由于片段抗体不具有 Fc 部分,因此它们 不干扰抗 Fc 介导的抗体检测。
查看使用 F(ab) 或 F(ab)2 片段抗体的优点
7. 是否需要抗 IgG 重链和轻链、抗轻链或抗 F(ab)2 二抗?我们以不同形式提供二抗:
抗 IgG 重链和轻链的抗体同时与 IgG 亚类的重链和轻链反应
抗轻链抗体与在所有免疫球蛋白类中均相同的一抗轻链反应
抗 F(ab)2 二抗与一抗的 F(ab)2 部分反应.
二抗IgG能检测它的亚型吗
多克隆一抗通常来源于兔、山羊、绵羊或驴,并且是IgG 同型。二抗通常为抗 IgG 重链和轻链的抗体。单克隆一抗通常来源于小鼠、兔和大鼠。例如,如果单克隆一抗为小鼠 IgG1,则 需要抗小鼠 IgG 或特异性较低的 F(ab) 片段抗小鼠 IgG。人免疫球蛋白类、亚类、型和亚型:类或同型:IgG ( heavy...
二抗有哪些
IgG抗体是免疫球蛋白的一种,它具有抗菌、抗病毒的能力,同时也是重要的二抗之一。它在检测感染病原、免疫反应中扮演着关键角色。由于其高亲和力和长时间持久的特点,常用于检测特定病原或病毒的感染情况。二、IgM抗体 IgM抗体是免疫球蛋白的一种亚型,它主要在机体早期抗感染过程中发挥作用。其作为二抗时,...
如何选择二抗
很多商业化的二抗都经过严格的质量控制和验证,确保其特异性和灵敏度。使用这些经过验证的二抗可以提高实验的可靠性和准确性。此外,还要关注二抗的纯度、浓度以及是否有适用的荧光标记等因素。根据实验需求选择合适的二抗亚型,如IgG的亚类。某些亚类可能在某些实验条件下具有更好的性能。考虑实验预算和实验...
一抗,二抗如何选择?
如果单克隆一抗为小鼠IgG的某一亚类,那么除了选择抗IgG的二抗外,还可以选择针对该亚类的二抗,此种抗体在双标记实验中尤其适合。如一抗同型为小鼠IgG1,那么可以选择抗IgG二抗或抗IgG1二抗。
如何选择二抗
如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合,或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠IgG1,那么你可以选择抗IgG1的二抗,此种抗体在双标记实验中尤其适合。如果你不知道一抗是哪一类别或亚类,那么抗小鼠...
二抗是什么意思
二抗是什么意思如下:二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质,去免疫异种动物,由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。用抗AIVH5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体,兔抗AIV IgG为第二抗体。
请问免疫组化如何正确选择和使用二抗
可以选择抗一抗来源种属广谱Ig或针对一抗亚型的二抗。如一抗是小鼠IgG1,可以选用山羊抗小鼠的Ig或IgG1的二抗。3.正确使用:也需要重新选择稀释比例。一般供应商提供稀释比例从1:10稀释度始,作5倍比稀释。参考网址on http://www.bio1000.com/zt/experiment/284333.html ...
一抗二抗简介
它的主要作用是检测一抗的存在,增强一抗信号的放大效果。二抗利用了抗体作为大分子蛋白质自身的抗原性质,通过异种动物免疫系统产生的特异性免疫球蛋白来识别一抗。例如,用抗AIV H5亚型血凝素单克隆抗体作为包被,兔抗AIV IgG作为二抗,是为了更准确地检测一抗的结合情况。简而言之,一抗是针对抗原的...
如何选择二抗
选择合适的二抗是实验成功的关键因素,主要依赖于一抗的特性和实验需求。首先,确保二抗与一抗的匹配性。如果一抗是单克隆抗体,通常需要与相同类别或亚类的二抗结合,如小鼠IgM对应抗小鼠IgM或抗小鼠IgG。对于未知类别的一抗,抗IgG是一个通用选择。二抗的选择取决于其特异性:全抗体(H+L):如anti-...
如何选择二抗——根据一抗种属及类型选择合适的二抗求解
【一抗的类别亚型】二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某...