免疫共沉淀,就是IP,中用的琼脂糖珠是什么东西,比如说我要做A蛋白的相关蛋白,
发布网友
发布时间:2022-04-26 09:12
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热心网友
时间:2023-10-09 04:19
IP是研究两个蛋白或者一个片段和一个蛋白之间有没有相互作用的 pull down是研究是否存在该蛋白的 至于前面的问题我还不太确定 应该是作为固相载体分离蛋白的
热心网友
时间:2023-10-09 04:19
protein A/G 能够和抗体的FC段结合,抗体和目的蛋白结合,目的蛋白和与其作用的蛋白结合
免疫共沉淀检测蛋白互作的原理和实验操作是什么?
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,简称Co-IP),是一项经典的生物学技术,它基于抗体与抗原之间精确的特异性结合,为我们揭示细胞内蛋白质间的相互作用提供了一把金钥匙。这项技术的核心原理是,通过将预先固定在琼脂糖珠子上的抗体(通常是蛋白质A的抗体)引入细胞或组织中,那些与A蛋白紧密结合的蛋白...
小分子抑制剂有哪些?
MedChemExpress ( MCE 中国 ) 致力于为生命科学研究提供高品质小分子活性化合物。作用于表观遗传学、PI3K/Akt/mTOR、凋亡、MAPK、Wnt 等 20 个信号通路的 375 个靶点蛋白,覆盖神经科学、免疫学等热门疾病研究领域。“确保客户拿到的每一个产品...
如何看免疫共沉淀图
分清Input和IP,再者就看用什么抗体IP。Input样品中有A和B蛋白,如果用A蛋白的抗体IP,A蛋白可以富集,在IP的样品中若同样可以检测到B蛋白的存在,说明A和B蛋白互作。将预处理过的10μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中4°C缓慢摇晃孵育2-4h,使抗体与protein A琼脂糖珠耦联...
免疫共沉淀实验的原理与过程?
免疫共沉淀Co-IP实验是一种通用的蛋白质相互作用研究方法,常用来鉴定两个或多个蛋白质之间可能存在的相互作用关系。coip实验的原理:Co-IP实验通常依赖于特异性判断,即将目标蛋白质及其交互蛋白带有特定抗体空间上结合,并利用这一结合关系来沉淀出其它交互蛋白。免疫共沉淀实验过程:1、细胞裂解:首先需要...
CircRNA免疫共沉淀实验的流程介绍?
免疫共沉淀:将裂解后的细胞提取物与特异性circRNA抗体预先结合,形成免疫复合物。通过旋转或摇床等方式,将免疫复合物与蛋白A/G琼脂糖磁珠(或亲和剂)结合,使抗体与目标circRNA结合的复合物以及相关的蛋白一同结合到琼脂糖磁珠上。洗涤:使用洗涤缓冲液洗涤琼脂糖磁珠,去除非特异性结合的细胞蛋白。土豆酶...
请问高手,免疫共沉淀中protein A 琼脂糖珠的作用原理?谢谢
prorein A或者 Protein G能特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段,所以能和抗体结合,抗体和你的目标蛋白结合,目标蛋白和相互作用的蛋白结合。
免疫共沉淀的优点
(4)将预处理过的10μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中4°C缓慢摇晃孵育2-4h,使抗体与protein A琼脂糖珠耦联;(5)免疫沉淀反应后,在4°C 以3,000 rpm 速度离心3 min,将琼脂糖珠离心至管底;将上清小心吸去,琼脂糖珠用1ml裂解缓冲液洗3-4次;最后加入15μl...
求做染色质免疫共沉淀的原理和大致步骤
利用识别特定蛋白的抗体,捕获与此蛋白相互作用的核酸.特定蛋白多半是能够与核酸结合的,转录因子,调控原件等等,而抗体可以是识别不同修饰的蛋白,例如乙酰化什么的,用于转录调控,表观遗传学研究等等 抗体挂到固相支持物上(磁珠或琼脂糖),制备亲和纯化柱 对细胞进行甲醛交联,固定蛋白与核酸的结合物 将蛋白...
做免疫共沉淀,请问是买PROTEIN A SEPHAROSE 还是AGAROSE
免疫共沉淀是如果有相互作用 目的蛋白结合Fc蛋白,Fc蛋白结合Protein A,Protein A结合琼脂糖基质 SEPHAROSE和AGAROSE都是琼脂糖,属于不同公司不同类型不同名称 所以理论上都可以用
什么是染色质免疫共沉淀技术(ChIP)?
染色质免疫共沉淀技术是在保持组蛋白和DNA联合的同时,通过运用对应于一个特定组蛋白标记的生物抗体,染色质被切成很小的片断,并沉淀下来的技术。这项技术主要用来分析目标基因有没有活性、或者分析一种已知蛋白(转录因子)的靶基因有哪些。该技术主要应用于以下几方面:1.组蛋白修饰酶的抗体作为“生物...
免疫共沉淀中的input control是什么意思
input control是是对照的一种,在细胞裂完离心之后、加入抗体ip之前吸出来的细胞裂解液。可以在wb曝光时显示目的条带的位置以及比较不同泳道之间用于IP反应的细胞蛋白量。比如有两组,一个对照一个给药,收了细胞以后裂解细胞做IP,会发现A和B的结合改变了。在得出这个结论之前要保证两组的IP体系里加...