WB转膜后清晰看到Marker在膜上，再用5%的BSA封闭，一抗过夜，二抗室温一个小时，显影定影后胶片一片空白？

发布网友发布时间：2022-04-26 09:52

共2个回答

热心网友时间：2023-10-09 07:14

有可能是你在转膜的时候把目的蛋白切丢了。有的时候由于各种原因，所要的目的蛋白并不一定在原来的分子量上显影，你如果按照应有的分子量切，就有可能把目的蛋白切丢。建议扩大面积转膜试试！

热心网友时间：2023-10-09 07:14

以前也出现过这种情况，问题不清楚，因为这里的太多可能出错的地方了

1)就像你说的抗体浓度问题，不过我觉得这里问题不是太大
2）你检测的东西的浓度问题，如果表达很低的话，曝光时间久要长了，但是你显影之后一点都没有的话，就有问题了。
3）ecl反应液有没问题？
4）曝光的时候的那张膜与胶片之间有没压紧?

做WB的时候最好是有正负对照，现在的有曝光的Marker，你可以买点试试~