病毒核酸的提取需要注意哪些?
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发布时间：2022-05-01 17:31
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时间：2022-06-20 08:14
2.戴口罩和勤换手套，去任何东西都要带着手套去取。
3.每次去器材的时候都要用镊子去夹，镊子要在酒精灯上烧一下。
4.所有的器材都要经过DEPC浸泡后高压后才可以使用，所需要的氯仿，酒精，异丙醇等都保证没有被RNA酶污染，不能用没有泡过DEPC的*头去提取液体，一定要用DEPC浸泡过的*头去吸，如果发现试剂有可能被污染了，要立即更换。
5.吸取上清一定不要吸到中间层的蛋白，如果吸到蛋白一定要重新用氯仿抽提，因为，吸到的蛋白很可能会对RNA产生降解作用。一定要少吸，不要贪多，RNA提取不要求量，更多的要求质。
6.最后用75%的酒精洗一次就可以，尽量减少RNA提取时间。
7.最后一步，用DEPC水溶解RNA，不要用太多的体积，以保证RNA的浓度。
提取完后，电泳观察结果，如果上面的两条带都比较清楚的话，说明RNA提取的不错，可以一次多逆转录几管，不要把RNA冻存，以后在逆转录的效果不好。
1． SARS病毒样品是具有高度传染性的样品，样品的采集、保存、运输、处理、实验应遵循国家相应的管理规范和生物安全条例，进行样品处理时必须做好相关的保护措施，并在P3实验室条件下小心操作，防止样品飞溅，以确保实验人员安全。
2． 本试剂盒只适用于体外检测。
3． 实验请分区操作：第一区为配液区：用来准备扩增所需试剂；第二区为样品提取区：准备样品和对照品处理；第三区为扩增区：PCR扩增检测。各区物品均为专用，不得交叉使用，避免污染，实验后立即清洁工作台。
4． 本试剂盒中，样品提取液可室温避光保存，由于提取液低温易结晶，为方便使用可先将提取液稍微加热促溶，待结晶溶解后，再置于室温避光处储存。
5． 试剂盒各样品管使用前，充分融化后混匀，并稍微离心。反应液分装时和加模板时都应尽量避免产生气泡，上机前各反应管注意盖紧，以免荧光物质污染仪器。
6． 扩增后，应避免打开PCR反应管，以免造成污染，废弃物品务请灭菌消毒后丢弃。工作台及各物品定期用10%次氯酸钠、75%酒精或紫外灯处理。
7． 由于SARS为RNA病毒，提取过程中应特别注意防止RNA酶对其的降解作用，所用加样器、离心管、*尖等均为专用，操作人员需穿洁净实验服，戴一次性手套和口罩，并且要勤换手套，减少RNA酶污染及交叉污染风险。
8． 本试剂所用的控制品为人工合成蛋白外壳包裹的假病毒，无感染性。
