【Help】所p片段内含有与引物高度相似的片段该如何设计引物PCR

发布网友发布时间：2022-05-01 15:53

共2个回答

热心网友时间：2022-06-19 02:34

引物的设计可以有很多种选择，例如你要特异性高可以设计长一点，引物上每多一个碱基可以增加几倍的特异性（多少倍忘了，看书），不过也有可能导致引物分数过低。也可以设计低特异性的，差几百个bp胶上完全看得出来，一切就完事了。
不过你带酶切位点，那下一步肯定是酶切克隆，那直接跑完切胶回收就完了~。。怎么设计不可以？

热心网友时间：2022-06-19 02:35

又不一定非要从那个基因的头开始P，只要把那个基因整个包含进去就行了，如果你非要刚好从头开始那就只能分段P然后再连啦，其实高度相似不是完全相同吧还是可以的毕竟大小差别貌似挺大的跑胶还是可以分开的