OPTI-MEM进行贴壁细胞培养的实验方法是什么?
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发布时间:2022-05-01 19:03
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时间:2022-06-21 15:08
无血清培养基可以提供细胞贴壁需要的一些基质,本文总结了利用无血清培养基OPTI-MEM进行贴壁细胞的脂质体转染试验材料,步骤、个人经验以及问题分析。
贴壁细胞的脂质体转染
一、实验材料
1、宿主细胞CHO(贴壁细胞)
2、脂质体LIPOFECTAMINE 2000(invitrogen公司)
3、6孔细胞培养版
4、无血清培养基OPTI-MEM(GIBICO)
5、转染级质粒
二、实验步骤
invitrogen的LIPOFECTAMINE 2000说明书上列举了24孔、12孔、6孔......板的实验体系,因为需要转染的细胞量大,所以一直采用的是6孔版做的转染。以下是以6孔板为例说明一下我的体系和方法吧!
1、转染前一天,以合适的细胞密度接种到6孔培养板上。(我的接种密度是3~4*105/ml.)转染时,细胞要达到90~95%的融合。
2、溶液1:240ul 无血清培养基 + 10 ul lipofectamine 2000 per well (总体积250 ul)(温育5min)
3、溶液2:X ul 无血清培养基 + 4 ug 质粒 per well(总体积250 ul)
……
详细资料请参考:on
http://www.bio1000.com/experiment/cell/237988.html
OPTI-MEM进行贴壁细胞培养的实验方法是什么?
一、实验材料 1、宿主细胞CHO(贴壁细胞)2、脂质体LIPOFECTAMINE 2000(invitrogen公司)3、6孔细胞培养版 4、无血清培养基OPTI-MEM(GIBICO)5、转染级质粒 二、实验步骤 invitrogen的LIPOFECTAMINE 2000说明书上列举了24孔、12孔、6孔...板的实验体系,因为需要转染的细胞量大,所以一直采用的是6孔版做的...
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实验室实验台材质的选择对于实验室的功能、安全性和耐用性至关重要。根据实验室的具体需求和特性,常见的实验台材质包括不锈钢、钢木、全钢、PP等。不锈钢实验台具有优异的耐腐蚀性和易清洁性,因此广泛应用于化学实验室和生物实验室,尤其是在...
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Opti-MEM什么意思
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lipo2000能用opti mem吗?
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转染用opti-mem选哪个货号
转染用opti-mem选无血清培养基 在做转染时,我们推荐用无血清培养基Opti-MEM®。这类培养基本身是不含有血清的,同时因为添加了化学成分有替代血清的作用。该培基用于细胞培养时,可以减小血清的添加量,因此叫做“Reduced Serum Medium”,即减血清培养基。
为什么用optimem培养基进行转染实验
2、optimem培养基有利于细胞恢复健康状态:其中使用了 HEPES 和碳酸氢钠进行缓冲,并添加次黄嘌呤、胸苷、丙酮酸钠、L-谷氨酰胺、痕量元素和生长因子。3、其他因素。【延伸回答】:无血清培养基Opti-MEM及用lipo2000或lipo3000转染质粒是否需要换液:关于lipo3000,及lipo2000转染后细胞是否需要换液,需要...
细胞转染补料液放多了怎么办
细胞转染补料液放多了解决方法:1.如为贴壁生长细胞,一般要求在转染前一日,必须应用胰酶处理成单细胞悬液,重新接种于培养皿或瓶,转染当日的细胞密度以70-90%(贴壁细胞)或2×106-4×106细胞/ml(悬浮细胞)为宜,最好在转染前4h换一次新鲜培养液。2.用于转染的质粒DNA必须无蛋白质,无RNA和...
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optimem和dmem区别
opti-mem和dmem区别为opti-mem释义为adj.最适宜的n.最佳效果;最适宜条件;[生物学] 最适度。dmem是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量,同时又分为高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长...