分子荧光分析法基本原理
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发布时间:2024-07-08 12:40
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时间:2024-07-08 17:29
分子荧光分析法是一种基于分子激发、去活化和荧光产生的原理进行的分析技术。这一过程主要包括三个关键步骤:
首先,分子的激发。当基态分子的偶数电子吸收光辐射后,电子跃迁到能量较高的轨道,形成单线激发态或三线激发态。单线态中电子自旋方向保持不变,而三线态则伴随着自旋方向的改变,受磁场影响产生能级*。
其次,分子去活化。激发态分子不稳定,通过振动弛豫、内转换、外转换、系间跨跃、荧光发射和磷光发射等方式快速回到基态,这个过程称为去活化。去活化途径的快慢决定了荧光的发生概率和强度。
最后,荧光的发生。分子通过选择性地释放能量以荧光形式返回基态,形成荧光发射。通过激发光谱和荧光光谱的测定,可以选择激发波长lex和荧光最强波长lem,这两个波长在定量分析中具有很高的灵敏度。分子的荧光强度与分子结构密切相关,共轭双键的存在以及p电子的共轭程度对荧光强度有很大影响。例如,芳香环和杂环化合物通常能发出荧光,而取代基对荧光强度有正负影响,吸电子基团会降低荧光强度。
总之,分子荧光分析法通过观察分子在特定光激发下的荧光特性,揭示其结构和性质,是化学分析领域中常用的有效工具。