小鼠白蛋白基因的高表达需要其基因上游10kb的元件(element)成分。_百 ...
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发布时间:2024-07-03 15:44
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时间:2024-07-25 11:00
【答案】:HNF3与裸露DNA和染色质都能结合,它优先与谁结合?$进行如下的间接末端标记实验:
①分离染色质,加入纯化的HNF3;
②用DNA酶Ⅰ消化染色质(轻度消化,滴定酶);
③移去蛋白质;
④用限制酶在HNF3结合位点附近切割;
⑤跑电泳,转膜;
⑥用探针测白蛋白基因的上游区。如果染色质呈核小体状态,则有特殊的带,否则只有一条连续的一片,不成带。$在HNF3与GATA4位点间加上或去除5个核苷酸使GATA4位点绕了半圈螺旋。这是因为HNF3位点在缠绕核小体的DNA中间,GATA4位点也必须在同一核小体内,因而旋转位点使之在内面(面向组蛋白),从而不能结合GATA4。