高效液相色谱分离原理
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发布时间:2024-07-05 11:31
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时间:2024-07-18 21:20
高效液相色谱是一种分离技术,主要基于液体流动相与液体固定相之间的分配平衡。两种方法,液—液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography, LLPC)和化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography, GPC),都涉及试样在两相间的分配。LLPC和GPC的关键区别在于流动相对分离顺序的影响,LLPC流动相对K值的影响较大,而GPC中流动相的影响较小。LLPC分为正相和反相,正相流动相极性小于固定液,反相则相反。
LLPC的一个挑战是,尽管要求流动相与固定相极性差异明显,但固定液仍可能在流动相中有微量溶解,以及流动相通过色谱柱时的冲击可能导致固定液流失。为克服这些缺点,化学键合固定相在70年代末期发展,如今应用广泛。相比之下,液—固色谱法(如硅胶、氧化铝等吸附剂)利用物质的吸附作用进行分离,溶质分子与吸附剂表面活性中心的竞争吸附影响分离结果。
离子交换色谱法(ION-EXCHANGE Chromatography)则基于离子交换树脂上的离子与流动相中相应离子的可逆交换。例如,阴离子交换剂会与带负电的溶质离子交换,形成具有不同亲和力的离子对,从而实现分离。离子对色谱法则是通过形成疏水型离子对,控制溶质离子的保留行为,特别适用于复杂混合物如生化试样的分离,如核酸、核苷和药物等。
离子色谱法使用离子交换树脂和电解质溶液,通常配合电导检测器,通过抑制柱消除背景离子影响。空间排阻色谱法(Steric Exclusion Chromatography)则利用凝胶作为固定相,分离依据分子大小而非相互作用力,大分子受阻,小分子保留值大,最先和最后出现在色谱图上。
扩展资料
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
HPLC分离原理是什么?
分子与填料颗粒之间的各种化学和/或物理相互作用决定了 HPLC 色谱柱选择性。HPLC 色谱柱和填料种类繁多,可满足不断扩大的应用需求。色谱柱化学键合相的选择性使测试样品中的各个组分能够彼此分离。然后在这些分离的组分离开色谱柱时,利用 HPLC 检测器对其进行检测和测量。
高效液相色谱法原理
1、高效液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。2、高效液相色谱法有“四高一广”的特点:(1)高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大...
高效液相色谱仪的工作原理?
高效液相色谱法是一种基于色谱分离技术的分析方法,通过色谱柱将样品中的各组分进行分离,并利用检测器对分离后的组分进行检测和分析。其基本原理包括色谱原理和检测技术原理两部分。二、色谱原理 高效液相色谱仪中的色谱柱内填充有特定的填料,这些填料具有不同的亲和力和选择性。当样品溶液通过色谱柱时,各...
高效液相色谱分离原理
高效液相色谱是一种分离技术,主要基于液体流动相与液体固定相之间的分配平衡。两种方法,液—液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography, LLPC)和化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography, GPC),都涉及试样在两相间的分配。LLPC和GPC的关键区别在于流动相对分离顺序的影响,LLPC流动...
高效液相色谱法的原理
原理:流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行分配。达到平衡时,服从于高效液相色谱计算公式:式中,cs—溶质在固定相中浓度;cm—溶质在流动相中的浓度; Vs—固定相的体积;Vm—流动相的体积...
高效液相色谱仪器原理是什么?
高效液相色谱仪器原理主要基于液固两相间的分配理论,采用高效微粒柱技术来分离和处理各种化学物质。其主要包括色谱分离和检测系统两部分。其核心分离机制包括吸附和离子交换,实现各组分在不同的溶剂环境中,因亲和力不同而被有效分离。其原理简述如下:一、液固两相分配理论 高效液相色谱的核心在于其色谱柱内...
超高效液相色谱原理
超高效液相色谱原理如下:一、分离原理 高效液相色谱法主要利用混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配平衡进行分离。在分离过程中,流动相携带样品通过固定相,不同组分在固定相和流动相之间的分配系数不同,因此会有不同的保留时间。二、检测原理 高效液相色谱法的检测原理主要是基于色谱柱流出组分的...
高效液相色谱(HPLC)简介:原理、组成、类型、用途及优缺点
高效液相色谱(HPLC),一种强大的分析工具,用于混合物中各成分的高效分离、鉴定和定量。它的核心原理是利用高压柱层析技术,取代了传统的低压方法,通过高达400个大气压的高压流体推动样品通过色谱柱,显著提升了分离效率。HPLC的仪器组成包括关键部件:高压泵负责输送流动相,进样器确保样品准确引入,色谱柱...
高校液相色谱分离原理是什么?
你这个问题光是分离原理就够我打字打半天了。高效液相色谱主要有4种,下面分别描述一下 1。液-固吸附色谱。固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的。吸附作用越强,K值越大,保留时间越长。2。液-液分配色谱。顾名思义,它是将固定液涂在担体上作为固定相的,它的分离...
高校液相色谱分离原理是什么?
粉笔相当于色谱柱,墨水相当于被测物质,墨水可以被粉笔吸附,然后再用另外一种吸附性质较小的流动相来冲,利用墨水中不同成分被柱子吸附程度的不同,使吸附性质较小的成分被流动相较快冲走,而吸附性质较强的成分则在流动相的冲击下缓慢前行,利用这个原理将几种不同成分的物质进行分离。 答案补充 ...