如果已经将质粒导入大肠杆菌,并将大肠杆菌放在含有四环素的培养基上培...

发布网友发布时间：2024-05-13 22:22

共3个回答

热心网友时间：2024-06-03 23:39

当然可以利用大肠杆菌制胰岛素，这就是基因工程方法。把胰岛素编码基因克隆到在大肠杆菌里的表达载体，通常都是可诱导型载体，以防止对大肠杆菌的毒性。然后在大肠杆菌里表达就可以得到胰岛素。

因为大肠杆菌里没有内质网（真核生物特有的细胞器），所以在大肠杆菌里合成胰岛素不需要内质网。

下面再补充点材料，能有利于加深理解，呵呵：

胰岛素具有两个特性使其能够利用基因克隆技术进行生产。一、胰岛素这种人体蛋白在翻译糖化后不再进行修饰，通过细菌合成的重组胰岛素是有活性的。二、分子量。胰岛素是相对较小的蛋白质，含有两个多肽，A链有21个氨基酸，B链有30个氨基酸。在人体中首先合成的是前胰岛素原，A链和B链通过C链相连，前端还有一段前导序列。翻译后，C链和前导序列被切除，A链和B链通过两个二硫键相连。
a) 合成和表达人工胰岛素基因
1978年合成了A链和B链的基因。人工合成的基因不一定与人体内的基因序列相同，但对应的氨基酸序列必须正确。
随后构建了两个重组的质粒，一个编码A链，另一个编码B链，每一个质粒中，人工基因都被插入到pBR322类的质粒的lacZ’读码框内。胰岛素基因就在lac启动子的控制之下进行合成，产生了的多肽含有β-半乳糖苷酶的最初几个氨基酸。两者之间的连接处是一个蛋氨酸残基，可以利用cyanogen bromide溴化氢从此处切开。最后将两条链用二硫键连接起来。效率很低。
b) 将整个地读码框B-C-A构建载体，这样就可以高效的形成二硫键。利用蛋白水解酶很容易将C链切下。

热心网友时间：2024-06-03 23:37

如果你的质粒带有四环素抗性，并成功转化入细菌，划板后可以长出单克隆菌落。

热心网友时间：2024-06-03 23:40

有些死亡有些存活并形成菌落根据你提的问题所使用的目的基因上应该有四环素抗性基因在导入目的基因时后质粒上就有了四环素抗性基因如果质粒表达则存活而被选择为人所用若不表达则死亡这是生物工程中常用的选择方式