...和absolute quantitative real-time PCR的区别
发布网友
发布时间:2024-04-29 18:24
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热心网友
时间:2024-06-25 10:27
Q-PCR就是定量的PCR,这其中包含real-time
PCR
real-time
PCR指的是用可以实时检测信号的机器来做PCR,最常用的是roche的light
cycler和applied
biosystems的机器,一般就是在PCR反应中加dye或者probe,每一个cycle都读一下荧光强度
Q-PCR还可以用其他的方法做,大部分其实都算作semi-quantitative,比如用普通的PCR机器做,保证在PCR的反应的线性区域的时候停止反应,这个时候得到的DNA的量应该是比较能够定量的(也经常有人添加含反射性元素P32的dCTP到反应中,敏感度比一般的PCR高)
至于RT
PCR,就是指reverse
transcription的PCR,就是从RNA得到cDNA以后进行的PCR,跟real
time没有什么直接关系
至于absolute,其实就是在做Q-PCR的时候做一个已知浓度的DNA/RNA/cDNA的standard
curve,然后根据未知浓度的样品PCR的结果在这个strandard
curve的位置来估计未知样品的浓度