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...载体和含目的基因的DNA片段是需使用同种限制酶是为什么?是怎么切割...

发布网友 发布时间:2024-05-09 14:38

我来回答

4个回答

热心网友 时间:2024-06-07 21:39

所用的同种限制酶是限制性内切酶,也叫做内切酶,至于具体用哪个内切酶,要根据你要切的序列进行分析,分析的软件很多,比如OMIGA,MEGA,primer premier......
至于怎么切割怎么连,下面已经说的很清楚了,简说,就是识别-切割-连接。

基因工程的主要步骤:
1.目的片段的分离与合成,获得目的片段
2.目的片段与载体连接(载体有两种,一种叫做克隆载体,为了大量获得该片段,并对在片段在基因层面进行研究;另一种叫做表达载体,为了将目的片段翻译成蛋白,对蛋白进行研究);
3.含有目的片段的载体导入宿主细胞内
4.对宿主进行检测和筛选,主要检测是否导入成功,和导入的基因是否你所要的;

热心网友 时间:2024-06-07 21:33

限制性内切酶识别特定的酶切位点,作用于DNA分子链上磷酸二酯键,同种限制酶才能切割出相同的粘性末端。连接时,相同的粘性末端通过碱基互补配对,在DNA连接酶的作用下形成磷酸二酯键。
基因工程的主要步骤:1、目的基因的获得;2、目的基因与表达载体的连接;3、表达载体向宿主的转化。

热心网友 时间:2024-06-07 21:33

这个是分子克隆最基本的原理,建议还是认真读书,会了解得更透彻些。

热心网友 时间:2024-06-07 21:33

是用同种限制酶,让他们的末端相同,碱基配对
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