发布网友 发布时间:2024-05-08 05:50
共1个回答
热心网友 时间:2024-05-29 15:02
揭秘PBST与TBST的配制差异
在磷酸化蛋白的Western Blot实验中,为何PBST不宜选用?关键在于PBST本身含有磷酸基团,可能影响实验结果。虽然两者都作为洗液使用,为蛋白提供稳定的pH缓冲环境,吐温20则有助于蛋白的顺利洗脱,但选择哪一种,取决于研究目标。
PBST是磷酸缓冲液与吐温20的组合,而TBST则是tris缓冲液与吐温20的搭档。比如,如果你的研究对象是酶的催化活性,PBST可能会对其产生抑制,此时TBST就成了更好的选择。因为tris缓冲液对于酶功能的影响相对较小。
蛋白质磷酸化,这个生物体内的普遍调节机制,指的是由蛋白质激酶催化ATP磷酸基团转移到氨基酸残基(丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸)的过程,或在信号传递中结合GTP。它在细胞信号转导中扮演着不可或缺的角色,是调节蛋白质活力和功能的基石,以其基础性和普遍性,对生命活动至关重要。
每一步实验选择都影响结果,理解并正确使用PBST或TBST,是实验成功的前提。希望以上的分享能为你的实验带来清晰的指导。