蛋白质凝胶电泳实验报告
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发布时间：2024-05-08 15:17
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时间：2024-05-31 22:53
实验四：探索蛋白质世界——凝胶电泳之旅
实验目的
通过这次实验，您将深入了解：
凝胶电泳的秘密：掌握琼脂糖和聚丙烯酰胺电泳的基本原理，以及它们如何在分子世界中扮演角色。
实践技能提升：熟悉并掌握琼脂糖凝胶电泳的操作技巧，提升实验技能。
电泳原理揭秘
电泳法基于蛋白质的电荷特性——它们在不同pH条件下带正或负电荷。在高于等电点的缓冲液中，蛋白质表现为负电，如同小船在电场的引导下向正极漂移。不同蛋白质的电荷差异、分子量大小，导致它们在电泳中的泳动速度各异，从而形成独特的区带图谱。
操作步骤与实践
要进行实验，您需要准备:
上样准备: 2ul的上样缓冲液
样品加载: 加入8ul的蛋白质，总共10ul的混合物
变性处理: 95-100℃离心10分钟，使蛋白质分子结构改变，便于分离
加入分离胶: 之后，您将蛋白质样本置于分离胶中，见证分离过程。
实验观察与现象解析
蛋白质形成的是亲水胶体，表面的水化层和电荷是其稳定因素。当这些因素被适当调控，蛋白质会发生凝集。实验过程中，您将有机会亲眼目睹这一过程。
实验小贴士
精准操作: 使用镊子时，尽量避免在条带中部戳取，以防刮落蛋白，最好从两端操作。
保持清晰: 染料挥发后，条带颜色会变淡，用胶带纸密封可以保持鲜明度。
标识清晰: 如果同时进行多个样品，记得做好标记，便于区分和分析。
快速操作: 在吸干薄膜上的缓冲液后，立即进行点样，以防止薄膜干燥影响实验结果。
