芽孢杆菌怎么灭菌
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发布时间:2024-05-02 09:16
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热心网友
时间:2024-07-26 20:30
温间歇灭菌法 此法是将待灭菌的制剂或药品,用60-80℃加热1小时,将其中的细菌繁殖体杀死,然后在室温或孵卵箱中放置24小时,让其中的芽胞发育成为繁殖体,再二次加热将其消灭为止。加热和放置需连续操作三次以上,至全部芽胞消灭为止。此法适用于必须用热法灭菌但又不耐较高温度的制剂或药品。本法的缺点,不仅需要时间长,并且消灭芽胞的效果常不够完全,应用本法灭菌的制剂或药品,除本身具有抑制力者外,须加适量抑菌剂,以增加灭菌效力
热心网友
时间:2024-07-26 20:30
耐酸耐热菌(库克)的检测方法
1 适用范围
本方法适用于清汁、浊汁、水和浓缩果汁中的耐酸耐热菌的检测。
2 仪器和试剂
2.1 恒温水浴:80±1℃。
2.2 恒温培养箱:40±1℃。
2.3 灭菌培养皿:直径为90mm。
2.4 灭菌试管:18×180mm。
2.5 滤膜:0.45um水系一次性滤膜。
2.6 酵母粉。
2.7 蛋白胨。
2.8 琼脂粉。
2.9 葡萄糖。
2.10 吐温80。
2.11 12.5%苹果酸。
2.12 灭菌蒸馏水。
2.13 K氏培养基平板:在1000ml的三角瓶中放入500ml蒸馏水,加入1.25g酵母粉、2.50g蛋白胨、6.50g琼脂粉、0.5g 葡萄糖和0.5ml吐温80,使其溶解,轻轻盖上三角瓶的盖子,在121℃灭菌25分钟;在一个小烧杯中加入10ml蒸馏水和1.25克的苹果酸,搅拌直至溶解,将苹果酸的水溶液用0.45um的滤膜过滤,将处理过的苹果酸水溶液加入到灭菌的K氏培养基中,搅拌均匀,使其pH值达到3.7±0.1。当冷却到大约50℃时,将K氏培养基倾注到培养皿中,凝固后在0-5℃的冰箱中储存,有效期60天,并记录配制日期。
3 操作步骤
3.1 样品处理
3.1.1 浓缩清汁:
打开水浴锅,调整温度到80±1℃。以无菌操作,取10ml浓缩清汁于15ml灭菌的试管中,再移取10ml浓缩清汁于另一带有温度计的15mL的试管中,作为温度控制用,盖上样品试管的盖子。将上述样品试管和温度控制试管放在水浴锅中,当温度达到80±1℃,开始计时,维持13分钟(用计时器计时)。冷却至室温,用90-100ml的灭菌蒸馏水将热处理过的样品转入灭菌容器中,摇匀。将稀释后的样品溶液用0.45um的滤膜真空过滤。
3.1.2 清汁、水:
打开水浴锅,调整温度到80±1℃。以无菌操作,取150ml清汁(或水)于已灭过菌的玻璃样品瓶中,再移取150ml清汁(或水)于另一带有温度计的玻璃样品瓶中,作为温度控制用,盖上样品瓶的盖子。将上述样品试管和温度控制试管放在水浴锅中,当温度达到80±1℃,开始计时,维持13分钟(用计时器计时)。将热处理过的样品冷却至室温,用0.45um的滤膜真空过滤。
3.1.3 浊汁:
打开水浴锅,调整温度到80±1℃。以无菌操作,取20ml浊汁于已灭过菌的试管中,再移取20ml浊汁于另一带有温度计的20mL的试管中,作为温度控制用,盖上样品试管的盖子。将上述样品试管和温度控制试管放在水浴锅中,当温度达到80±1℃时,开始计时,维持13分钟(用计时器计时)。冷却至室温,将热处理的样品用0.45um的滤膜真空过滤。
3.2 培养及计数
取掉过滤器的上部装置,用灭菌的镊子,将过滤膜从过滤器上取下放在K氏培养基上,轻敲数次,以保证滤膜与培养基接触。倒置于40-41℃恒温培养箱中,在恒温培养箱底部放置一个有水的盘子,以调整恒温培养箱的湿度,培养5天。培养结束后,记录该培养温度下滤膜上的菌落数。
根据对样品的污染情况,可选择稀释度。用灭菌吸管吸取25ml样品,加入到225ml灭菌蒸馏水中,做成1:10的稀释度;用灭菌吸管吸取1:10的稀释液25ml,加入到225ml灭菌蒸馏水中,做成1:100的稀释度,稀释后的样品的检测方法同上。培养结束后,记录滤膜上的菌落数,并按相应的稀释度进行计算。
4 数据处理
结果报告10ml的浓缩清汁样品中含有的菌落数,报告单位为cfu/10ml。
结果报告150ml的清汁(或水)样品中含有的菌落数,报告单位为cfu/150ml。
结果报告20ml的浊汁样品中含有的菌落数,报告单位为cfu/20ml。
参考资料:库克实验室耐热耐酸菌的检测方法。
求助芽孢杆菌灭菌方法
温间歇灭菌法 此法是将待灭菌的制剂或药品,用60-80℃加热1小时,将其中的细菌繁殖体杀死,然后在室温或孵卵箱中放置24小时,让其中的芽胞发育成为繁殖体,再二次加热将其消灭为止。加热和放置需连续操作三次以上,至全部芽胞消灭为止。此法适用于必须用热法灭菌但又不耐较高温度的制剂或药品。本法...
杀灭细菌芽胞最常用而有效的方法是a紫外线照射b干烤灭菌法c间歇...
杀灭细菌芽胞最常用而有效的方法是干烤灭菌法。干烤灭菌法是一种通过高温干热处理来消灭微生物的方法,可完全杀死微生物及其孢子和病毒。该方法使用高温(通常在160到170°C之间)对物体进行加热,使细菌芽孢失去活性。这种方法比其他方法更为常用,因为它能够彻底消除微生物的污染,并且可以在许多不同的环...
求助芽孢杆菌灭菌方法
1. 温间歇灭菌法是一种特定的灭菌手段,它涉及将需要灭菌的制剂或药品在60至80摄氏度下加热一小时,这一步骤能有效杀死大部分细菌繁殖体。2. 接下来,在室温或孵卵箱中放置24小时,允许剩余的芽孢发育成细菌繁殖体。3. 然后,再次加热以消灭这些发育后的细菌,这一过程需要连续进行三次以上,以确保所...
芽孢杀死温度?
推荐群林枯草芽孢杆菌,效果不错。湿热灭菌法消灭细菌一般采用121摄氏度,灭菌20-30min。如果是产孢子的微生物则应采用灭菌后适宜温度下培养几小时,待其繁殖成为胞体后再灭菌,连续三次以用于杀死萌发的孢子。这是因为煮沸100℃,5分钟,能杀死一般细菌的繁殖体。许多芽胞需经煮潮5~6小时才死亡。
干热灭菌在什么温度和时间能灭死环状芽孢杆菌
细菌芽孢的灭活温度都差不多,所以通常能杀灭其他芽孢杆菌的干热灭菌温度和时间,也能杀灭环状芽孢杆菌。芽孢杆菌在不产生芽孢时,80℃~100℃ 1小时可被杀死。而芽胞需要加热至160℃~170℃ ,需要至少2小时才能杀灭。
100℃灭菌用什么生物指示剂挑战
芽孢杆菌。100℃灭菌通常用芽孢形成菌属中的芽孢杆菌作为生物指示剂进行挑战测试。其中,常用的芽孢杆菌包括Bacillusstearothermophilus和Bacillussubtilis等。这些芽孢杆菌具有较高的热稳定性,可以在高温下存活,并且易于培养和检测。在进行100℃灭菌的过程中,将芽孢杆菌悬浮液喷洒在灭菌物品表面,然后进行灭菌处理...
杀灭细菌芽孢的最有效方法是
利用紫外辐射和电离辐射杀灭微生物,如杀灭空气中或物体表面的微生物。紫外线使被照射物分子或原子的内层电子提高能级,但不引起电离,以波长265~266nm的杀菌力最强。某些细菌(芽孢杆菌,梭状芽孢杆菌,少数球菌等)在其生长发育后期,在细胞内形成的一个圆形或椭圆形,厚壁,含水量低,抗逆性强的休眠体...
求教“枯草芽孢杆菌”、“细菌内毒素”、“热原” 的产生、生存环境、还...
一、枯草芽孢杆菌 1、产生:广泛分布在土壤及腐败的有机物中,易在枯草浸汁中繁殖,故名。空气中也会有存在。2、生存环境:需氧菌。生存条件恶劣时,细胞营养体会形成生命力极强的芽孢。3、杀死方法:121℃高温高压灭菌;或环氧乙烷灭菌;或辐射灭菌。二、细菌内毒素 1、产生:是革兰氏阴性菌的细胞壁...
请教:对微生物间歇灭菌的有关问题。
(1)可以,芽孢萌发温度一般在室温(25度)便可进行的,因为芽孢杆菌就是室温微生物。实验室培养温度25-28度。(2)间歇时间取决于芽孢萌发需要的时间。芽孢杆菌生长速度很快,理论上最适温度下甚至不需要4小时,但若温度过低导致不萌发也有可能的。分析:第一次灭菌一定要蒸透,冒气后至少维持30-40...
生物实验室消毒有哪些消毒剂能杀灭芽孢、孢子?
3. 产芽孢细菌的保藏多用其芽孢。产芽孢的细菌多为杆菌,也有一些球菌。4. 芽孢的有无、形态、大小和着生位置是细菌分类和鉴定中的重要指标。5. 芽孢与营养细胞相比化学组成存在较大差异,容易在光学显微镜下观察。(相差显微镜直接观察;芽孢染色)芽胞是人人都讨厌和害怕的一种生物,因此灭菌也一直...