如何降低杂交瘤细胞培养成本

1、动物细胞无血清悬浮培养技术研制开发了多种适合于杂交瘤细胞、rCHO细胞、昆虫细胞大规模悬浮培养过程的无血清/无蛋白培养基组成，成分明确，且细胞生长和产物表达水平与有血清培养基相当，成本比国外同类产品降低30%以上，其技术特点在于不仅能促进细胞生长、防止细胞损伤，而且还能支持细胞在大规模生物反应...

(1)固定化细胞培养的细胞密度较一般悬浮培养高10～100倍,但同时也带来了如何保证足够的营养物质和氧的传递问题。(2)细胞群体在大规模、长时间培养过程中分泌产物能力的丢失或产物活性的降低依然是细胞培养领域深感棘手的问题。包埋在凝胶或微囊中死亡的细胞会对其他细胞产生污染和毒害作用。(3)培养基及固...

（1）显微操作法：在显微镜下取单细胞，然后进行单细胞培养。这种方法操作复杂，效率低，故不常用。（2）有限稀释法：将对数生长期的杂交瘤细胞用培养液作一定的稀释后，按每孔1个细胞接种在培养皿中，细胞增值后成为单克隆细胞系。第一次克隆化时加一定量的饲养细胞。由于第一次克隆化生长的细胞不能...

第一种方法是：增量培养法，即将杂交瘤细胞在体外培养，在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备，一般应用无血清培养基，以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。第二种也是最普遍采用的方法是小鼠腹腔接种法。选用BALB/c小鼠或其亲代小鼠，先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔注射，一周后将杂交瘤细胞接种...

①实体瘤法：对数生长期的杂交瘤细胞按1～3×107/ml接种于小鼠背部皮下，每处注射0.2ml,共2～4点。待肿瘤达到一定大小后（一般10～20天）则可采血，从血清中获得单克隆 抗体的含量可达到1～10mg/ml。但采血量有限。②腹水的制备：常规是先腹腔注射0.5ml Pristane (降植烷)或液体石蜡于BALB/C鼠...

1个B细胞只能产生1个抗体。方法是细胞工程杂交技术和B细胞杂交瘤技术 需要将单克隆B细胞和肿瘤细胞相结合才可以永久产生单抗 Barski等发现细胞额自然融合现象,但是频率很低 冈田等发现灭火的仙台禀赋和聚乙二醇能显著提高细胞融合的效率。 二、单抗制备的基本条件 需要培养正常的B细胞以及B细胞融合的肿瘤细胞 1. 动物...

5．另取杂交瘤细胞悬液和 0.5%琼脂等体积混合（0.25%琼脂） ，加 2ml 到预先铺有底层琼脂 的瓶皿内。6．CO2 温箱培养。7．10~15 天后，有细胞集落形成，适时移入 24 孔培养板中扩大培养。如用琼脂糖，底层浓 度为 0.6%，上层为 0.3%琼脂。[有限稀释法]1．制备有饲养细胞底层的细胞培养...

通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔细胞培养板上培养，使每孔细胞不超过一个（理论上30%的孔中细胞数为0时，才能保证有些孔中是单个细胞），再由这些单细胞克隆生长，然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还...

所谓克隆化培养就是扩大培养，也就是增加杂交瘤细胞的数量，可以提高单克隆抗体的产量，这里的克隆指的是无性繁殖，与克隆羊多莉是不同的。通俗的讲就是指杂交瘤细胞在一定的培养基中进行有丝分裂，产生大量的相同的都可以产生单克隆抗体的细胞

同时,血清来源有限,各批量间质量差异大,直接影响杂交瘤细胞的连续性培养。另外,血清中潜藏的支原体是污染动物细胞的隐形杀手,不易察觉,而且其价格成本昂贵。为了克服血清的这些缺点,应用无血清培养基将会成为杂交瘤细胞培养的一种新趋势。无血清培养(serum free medium,SFM)的实质就是有针对性地使用添加剂...