从PBMC中进一步分离T.B淋巴细胞可采用哪些方法
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发布时间:2022-05-03 08:17
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热心网友
时间:2023-10-16 09:08
先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物,然后用CD4+T细胞的单抗,免疫磁珠法分离;或者利用流式细胞仪进行分选。
如果精确的话得用专门仪器了,要后续培养干扰小建议磁珠分,这个操作比较简单,对设备要求不高,如果是要纯度高推荐流式细胞术了,这个需要有分选的仪器,一般分析仪器只能分析比例。
扩展资料:
操作步骤:
1、取外周静脉血,用肝素抗凝,加等量的Hank’s液并混匀。
2、将分层液加入试管中,用量约为血量的1/2。用吸管沿管壁缓缓将血加入分层液面上。
3、置于水平离心机离心,1 500r/min,10min。可见绝大多数单个核细胞悬浮于血浆和分层液的界面,呈白膜状。
4、用尖吸管吸取界面的细胞层,置于另一试管中,加入适量的Hank's液,混匀后以1000r/min,离心10min,弃上清。
5、同法洗涤细胞2次。
6、将细胞重悬于RPMI—1640培养液中,4℃保存备用。
参考资料来源:百度百科-外周血单个核细胞
热心网友
时间:2023-10-16 09:08
免疫磁性微珠分离法、Percoll不连续密度梯度沉淀法
热心网友
时间:2023-10-16 09:09
要用很多测量的系统
从PBMC中进一步分离T.B淋巴细胞可采用哪些方法
先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物,然后用CD4+T细胞的单抗,免疫磁珠法分离;或者利用流式细胞仪进行分选。如果精确的话得用专门仪器了,要后续培养干扰小建议磁珠分,这个操作比较简单,对设备要求不高,如果是要纯度高推荐流式细胞术了,这个需要有分选的仪器,一般分析仪器只能分析比例。
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