发布网友 发布时间:2022-05-04 20:55
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热心网友 时间:2022-06-25 20:06
摘要1、组织取材固定不当如组织取材过大或过厚,所用固定液浓度过大,穿透力较小时,不能将组织完全固定,组织切片染色后出现切片外周固定好的部分细胞着色清晰,但中间或未固定好的组织细胞着色模糊,从而造成染色不均。2.组织脱水时间过短组织中含有水分,进而使透明、浸蜡不彻底。这种处理不彻底的组织,虽然有时也能勉强切片,但切片厚薄不均,再染色时就会出现染色不均,片状灰染现象。3、切片厚薄不均或有横纹4、染色过程处理不当1)组织切片脱蜡不彻底,如溶蜡剂及乙醇不纯或使用时间过久、室温低时,组织切片上的石蜡没有全部除掉时、含蜡部分不着色或着色较浅而无蜡部分着色较深,因此造成染色深浅不均;2)染液或试剂量少,组织切片没被全部浸染到;3)分化不当、分化剂浓度过大、分化力过强、分化后没有迅速入水终止分化,可造成染色过淡、过深或染色不均等现象;4)如果组织切片上有气泡,则气泡内的组织可能染不上色,以致镜下出现染色不均现象。切片模糊不清(灰染)的原因1、取材在取材时组织标本已经发生酶腐自溶,或取材后没能及时固定、固定液浓度不够,必然造成组织结构模糊不清,这是由于组织结构分解变性、组织变酸所致,因而切片被染成灰蓝色。另外,固定前已经干枯的标本,染色后易在干枯区域内出现成片的灰染现象,很难补救。2、固定1)固定剂对组织有一定的媒染作用,它既可与蛋白质结合,又能与染料结合,故可增强着色能力;同时固定剂能沉淀和凝固细胞内成分,使细胞内成分产生不同的折光率,造成光学上的差异。使得原本看不清的结构变得清晰起来,所以,组织固定不良是造成切片染色模糊不清的主要原因。2)存放标本的固定液浓度不易过高或过低,浓度偏低,在正常固定时间内蛋白质沉淀和凝固必然不充分,使细胞内成分产生的不同折射率差异不够显著,原来看不清的结构液就不能清晰起来。而且由于浓度低、固定不足,其媒染效果也差,故易出切片模糊不清现象。浓度过高,对蛋白质沉淀和凝固作用太强,是使组织表面迅速变硬,减弱了固定液对组织的渗透能力,造成组织中间部分固定不佳,甚至达不到固定目的,亦易出现模糊不清现象。补教方法:可换成正常的固定液重新固定。3)在送检的标本中,有时临床科用乙醇固定组织,常温下,乙醇沉淀的咨询记录 · 回答于2021-09-24he切片组织分散原因分析1、组织取材固定不当如组织取材过大或过厚,所用固定液浓度过大,穿透力较小时,不能将组织完全固定,组织切片染色后出现切片外周固定好的部分细胞着色清晰,但中间或未固定好的组织细胞着色模糊,从而造成染色不均。2.组织脱水时间过短组织中含有水分,进而使透明、浸蜡不彻底。这种处理不彻底的组织,虽然有时也能勉强切片,但切片厚薄不均,再染色时就会出现染色不均,片状灰染现象。3、切片厚薄不均或有横纹4、染色过程处理不当1)组织切片脱蜡不彻底,如溶蜡剂及乙醇不纯或使用时间过久、室温低时,组织切片上的石蜡没有全部除掉时、含蜡部分不着色或着色较浅而无蜡部分着色较深,因此造成染色深浅不均;2)染液或试剂量少,组织切片没被全部浸染到;3)分化不当、分化剂浓度过大、分化力过强、分化后没有迅速入水终止分化,可造成染色过淡、过深或染色不均等现象;4)如果组织切片上有气泡,则气泡内的组织可能染不上色,以致镜下出现染色不均现象。切片模糊不清(灰染)的原因1、取材在取材时组织标本已经发生酶腐自溶,或取材后没能及时固定、固定液浓度不够,必然造成组织结构模糊不清,这是由于组织结构分解变性、组织变酸所致,因而切片被染成灰蓝色。另外,固定前已经干枯的标本,染色后易在干枯区域内出现成片的灰染现象,很难补救。2、固定1)固定剂对组织有一定的媒染作用,它既可与蛋白质结合,又能与染料结合,故可增强着色能力;同时固定剂能沉淀和凝固细胞内成分,使细胞内成分产生不同的折光率,造成光学上的差异。使得原本看不清的结构变得清晰起来,所以,组织固定不良是造成切片染色模糊不清的主要原因。2)存放标本的固定液浓度不易过高或过低,浓度偏低,在正常固定时间内蛋白质沉淀和凝固必然不充分,使细胞内成分产生的不同折射率差异不够显著,原来看不清的结构液就不能清晰起来。而且由于浓度低、固定不足,其媒染效果也差,故易出切片模糊不清现象。浓度过高,对蛋白质沉淀和凝固作用太强,是使组织表面迅速变硬,减弱了固定液对组织的渗透能力,造成组织中间部分固定不佳,甚至达不到固定目的,亦易出现模糊不清现象。补教方法:可换成正常的固定液重新固定。3)在送检的标本中,有时临床科用乙醇固定组织,常温下,乙醇沉淀的针对以上情况如何纠正,去除原因,解决问题。原因1、取材在取材时组织标本已经发生酶腐自溶,或取材后没能及时固定、固定液浓度不够,必然造成组织结构模糊不清,这是由于组织结构分解变性、组织变酸所致,因而切片被染成灰蓝色。另外,固定前已经干枯的标本,染色后易在干枯区域内出现成片的灰染现象,很难补救。2、固定1)固定剂对组织有一-定的媒染作用,它既可与蛋白质结合,又能与染料结合,故可增强着色能力;同时固定剂能沉淀和凝固细胞内成分,使细胞内成分产生不同的折光率,造成光学上的差异。使得原本看不清的结构变得清晰起来,所以,组织固定不良是造成切片染色模糊不清的主要原因。2)存放标本的固定液浓度不易过高或过低,浓度偏低,在正常固定时间内蛋白质沉淀和凝固必然不充分,使细胞内成分产生的不同折射率差异不够显著,原来看不清的结构液就不能清晰起来。而且由于浓度低、固定不足,其媒染效果也差,故易出切片模糊不清现象。浓度过高,对蛋白质沉淀和凝固作用太强,是使组织表面迅速变硬,减弱了固定液对组织的渗透能力,造成组织中间部分固定不佳,甚至达不到固定目的,亦易出现模糊不清现象。补救方法:可换成正常的固定液重新固定。3)在送检的标本中,有时临床科用乙醇固定组织,常温下,乙醇沉淀的白蛋白、球蛋白不再溶于水,而核蛋白则可再溶于水,因此造成乙醇固定的标本,切片核染色不良,胞质染色也较差,切片出现模糊不清现象。补救方法:用4%中性甲醇对标本再固定。4)在日常病理制片工作中经常发现淋巴组织(淋巴结、鼻咽部组织及扁桃体等)由于处理不当造成切片染色后组织出现发灰现象,其主要原因可能是其细胞密集、结构复杂,导致固定液较难渗透到组织深部,从而造成组织*固定不佳,而出现切片发灰现象。可以等量无水乙醇乙醚混合处理切片5-10min,95%乙醇、80%乙醇、水洗,35 硫酸铁铵溶液补充媒染5min. 3、温度包埋时如果温度过高或切片后烤片温度过高,均会使蛋白质发生变质,可能发生拒染,造成切片染色模糊不清。4、脱蜡切片脱蜡不彻底造成不着色或着色很淡,镜检时切片模糊不清。5、染料染料质量差或染液配制失当,如配制苏木精时加热使氧化过度,不能生成三氧化苏木红,生成四氧化苏木红,使染液没有染色能力:或苏木精使用时间过久,导致切片着色不良,切片模糊不清.6、分化过度胞核、胞浆着色较淡,致切片模糊难辨。7、脱水、透明不彻底根据这些原因注意一下就可以解决的哦如何解决体积小,易碎裂的组织或器官,再繁杂的脱水和包埋中丢失切片中损失。将3%的琼脂预包埋的组织放人脱水包埋盒中进行脱水、透明和浸蜡。经过常规程序的脱水、透明和浸蜡,最终将组织和琼脂一起包埋在石蜡中,石蜡切片和染色如常。还有其他方法吗这个我就不太清楚了,,不好意思您可以咨询一些更专业的人士