可以用 DTT代替2-mercaptoethanol吗
发布网友
发布时间:2022-05-04 19:02
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热心网友
时间:2022-06-25 04:31
可以的。
DTT和2-ME(2-mercaptoethanol的简称,下同)都属于巯基试剂。
也就是说DTT和2-ME的作用是一样的:可以防止蛋白质或酶等分子中的巯基氧化成二硫键,维持体系的还原性环境。
β-巯基乙醇和DTT都是还原剂,防止蛋白质被氧化,β-巯基乙醇常用浓度为5-20MMOL/L,DTT为0.5-1MMOL/L。因为β-巯基乙醇加入缓冲液后24小时易被氧化,其后加速蛋白质的失活,而DTT氧化后形成稳定的分子内二硫健,并不危及蛋白的巯基,所以在蛋白制备中常用β-巯基乙醇,而长期储存用DTT。还有其上提到的试剂浓度均指终浓度。
至于使用浓度,DTT和2-ME的工作浓度一般为1-5mM,如果2-ME的浓度是1mM,由于DTT的氧化能力强于2-ME,DTT的浓度用0.5-1mM就可以了。
热心网友
时间:2022-06-25 04:31
DTT代替2-mercaptoethanol是完全可行的
DTT和2-ME都属于巯基还原剂,他们的功能作用是完全一样的,都是可以打开二硫键让-SH保存还原状态
区别就会DTT的还原性要强于2-ME,所以使用浓度要比2-ME要低很多。而且DTT的毒性要远远小于2-ME
所以DTT代替2-mercaptoethanol是完全可行的