如果一个PCR反应凝胶检查后,除了目标条带外还出现淡淡的杂带,分析其...

这个有很多原因的！最大的原因也是最常见的原因是：1模板不纯，二引物特异性不高，三：退火温度偏低。第四：酶的活性过高，五镁离子浓度不适 解决的办法有：1：将模板稀释，2：提高退火温度或者递减PCR，3：降低PCR各个组分的量，如酶的量减半，引物和DNTP的量也减半 4：重新设计引物 ...

通过凝胶成像系统拍摄图片，注意调整对比度。如果是写报告的话，可以标记出marker各条带的分子量以及亮度，详见说明书；然后说明扩增片段与目的片段大小相同，均为xx；如果图像上有杂带可以分析一下，比如可能是引物二聚体之类的情况，以便下次实验可以酌量调整退火温度或者各成分的用量。

其原因:一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数 过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶 则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增.其对策有:①必要时重新设计引 物.②减低...

因为一般情况下引物二聚体的条带都是或多或少的存在的。 如果是目的条带有两条，那么可能是引物出现了错配，也有可能是本身就有两种可能。回收测序即可。 追问： 两条带距离很近，一条很亮一条很暗，用的DNA基因组 回答： 基因组DNA的话有杂带几乎不可避免，因为错配可能很大，挺正...

聚合酶链反应(英文全称:Polymerase Chain Reaction),简称PCR。聚合酶链反应(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础...

PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带。非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数 过多有关。其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源...

能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为3个细菌。 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定...

有可能是没有目标基因，导致PCR只有杂带 PCR片段过长，无法得到目标产物 PCR说明：聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀...

应该是两条挨得很近的条带。可能是pcr回收产物有杂带污染，跑pcr产物的时候没有分开，然后回收纯化以后，再跑就分开了。这个酶切之后跑电泳也是两条带。双酶切的话，没关系的，照样回收照样连，照样出结果。

如果条带不够亮，还有拖尾、非特异条带、引物二聚体等问题，那就是你反应体系中需要优化。1、出现非特异扩增可能是你的引物设计上特异性差或者引物浓度过高，Mg浓度或酶含量过高（适当改变Mg浓度从1mM到3mM，间隔0.5mM进行梯度试验，或者酶含量改变按0.5U为间隔梯度试验。）2、如果出现拖尾，，要考虑...