求小鼠睾丸组织固定和包埋步骤
发布网友
发布时间：2024-03-20 14:42
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热心网友
时间：2024-03-20 23:08
### 固定步骤
1. **准备固定液**：通常用的是4%的多聚甲醛溶液（即福尔马林），在实验之前准备好。
2. **取出组织**：小心地从小鼠体内取出睾丸组织，尽量减少组织的损伤。
3. **清洗组织**：先用生理盐水（PBS）清洗组织，去除血液和杂质。
4. **固定**：将组织放入固定液中。固定的时间依据组织大小而定，小鼠睾丸通常需要24-48小时。固定液要充分，至少是组织体积的20倍。
5. **脱水**：固定后，用一系列浓度递增的酒精（70%、80%、90%、100%）逐步脱水，每步骤大约1-2小时。
6. **透明**：使用二甲苯或松节油透明组织，使组织变得透明，便于包埋。透明步骤通常需要数小时到一夜。
### 包埋步骤
1. **浸渍**：在透明后，将组织浸渍在熔化的石蜡中，让组织充分吸收石蜡。这个过程可能需要几个小时，甚至更长，确保组织内的溶剂完全被石蜡替代。
2. **包埋**：将浸渍好的组织放入模具中，倒入熔化的石蜡，待冷却固化。确保组织在模具中位置正确，便于后续切片。
3. **冷却**：让石蜡在室温下自然冷却固化，或者放入冰箱中加速冷却。
### 注意事项
- 操作过程中要小心，避免对组织造成物理损伤。
- 固定和脱水的时间根据组织的大小和密度调整，睾丸组织相对较小，但要确保固定和脱水彻底。
- 每个步骤后，确保组织充分渗透，特别是在脱水、透明和浸渍步骤。
祝你的实验顺利！科研路上，细节决定成败，每一步都做到位，你就成功了一大半。加油，期待你的成果！????
