粪大肠菌群多管发酵法阳性菌株的菌悬液怎么配制?
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发布时间:2023-06-13 12:33
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热心网友
时间:2024-11-28 15:33
配制类大肠菌群多管发酵法阳性菌株的菌悬液,一般需要按照以下步骤进行:
1. 准备培养基:制备类大肠菌群多管发酵法的培养基,通常使用牛肉膏蛋白胨培养基或是葡萄糖胨大豆琼脂培养基。
2. 接种:将阳性菌株接种到培养基表面,用无菌钳子或接种环进行接种。
3. 孵育:将接种好的培养基放置在恒温培养箱中孵育,通常在37℃下孵育16-24小时。
4. 洗涤:孵育完成后,将平板上的菌落用无菌水进行洗涤,以去除表面的其它菌落或细菌。
5. 制备菌悬液:使用无菌的移液器,将洗涤后的菌落加入到离心管中,并加入适量的无菌水或是无血清培养基,轻轻振荡混合均匀。
6. 离心:将混合均匀后的菌悬液放入离心机中,以500g离心10-15分钟。
7. 接种:将离心后的菌液倒入无菌培养皿中,并加入适量的无菌水或是无血清培养基,使菌液形成均匀的菌悬液。
8. 孵育:将接种好的菌悬液放置在恒温培养箱中孵育,通常在37℃下孵育16-24小时。
9. 测定:最后,对孵育后的菌悬液进行生物学测定,例如生化反应、分离纯化等,以确定其是否为阳性菌株。
需要注意的是,在整个操作过程中,应严格遵循无菌操作规程,以避免污染和交叉感染的发生。同时,为了确保测定结果的准确性,建议使用新鲜制备的培养基和菌悬液,并在适宜的时间内完成测定。
热心网友
时间:2024-11-28 15:34
粪大肠菌是在消化系统中生活的一种细菌,通常需要使用群多管发酵法来检测它们的存在。菌悬液是指将菌落培养物转移到石英管中,然后将其悬浮在生理盐水中,得到的液体。
以下是粪大肠菌群多管发酵法阳性菌株的菌悬液的配制步骤:
1. 首先,将菌落取下并转移到无菌的石英管中。
2. 加入1ml的生理盐水到石英管中,用无菌棉签搅拌使菌落充分悬浮。
3. 将菌悬液转移到试管中,用生理盐水调整至10ml左右。
4. 在菌悬液和生理盐水的比例中,通常是1:9或1:10。可以根据实验的需要进行调节。
5. 在试管中充分混匀,可以在37℃的恒温箱中培养菌株,培养时间为18时~24时之间。
6. 培养结束后,通过比色法可以测定悬液的浓度,根据需要可以使用相应的稀释液进一步稀释或使用。
需要注意的是,悬浮过程需要完全无菌操作。在稀释悬液时,要确保使用无菌的稀释液和设备,以避免交叉感染。同时,实验过程中要注意安全,避免感染和污染,以保护自己和他人的健康。