体外培养的细胞需要什么样的环境条件?
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发布时间:2023-06-10 23:08
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时间:2023-10-03 06:01
1.实验室
细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响.细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁,空气清新,干燥和无烟尘.细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室.
2.常用设施及设备
⑴超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式,直流式和外流式三大类.
⑵无菌操作间:一般由*间,缓冲间和操作间三部分组成.操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱,离心机,倒置显微镜等.缓冲间可放置电冰箱,冷藏器及消毒好的无菌物品等.
⑶操作间:普通培养箱,离心机,水浴锅,定时钟,普通天平及日常分析处理物
⑷洗刷消毒间:烤箱,消毒锅,蒸馏水处理器及酸缸等.
⑸分析间:显微镜,计算机及打印机等.
3.培养器皿
常用细胞培养器皿有培养瓶,培养板,培养皿等.常准备量是使用量的三倍.器皿应选择透明度好,无毒,利于细胞粘附和生长的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品.常用的器皿有下面几种.
⑴液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液,血清等液体,常用规格有500ml,250ml,100ml等几种.
⑵培养瓶:根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异,用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀,便于细胞贴壁生长和观察,瓶口要大小一致,口径一般不小于1cm,允许吸管伸入瓶内任何部位,规格有200ml,100ml,50ml,25ml,10ml等几种.
⑶培养皿:用于开放式培养及其它用途.分直径30mm,60mm,120mm等几种.
⑷吸管:常用的有长吸管和短吸管两类,长吸管也称刻度吸管.其改良后管上部有球型刻度称改良吸管,刻度吸管用于移动液体.常用1ml和10ml两种.短吸管也叫滴管,分弯头和直头两种.
⑸离心管:离心管是细胞培养中使用最广泛的器皿,根据用途不同形态各样,常用于细胞培养的离心管有大腹式尖底离心管和普通尖底离心管两类.前者分别为50ml,30ml,15ml;后者则多为10ml和5ml.
⑹其它:如三角烧瓶,烧杯,量筒,漏斗,注射器等.
4.细胞培养温度
维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度.不同种类的细胞对培养温度要求也不同.人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响,甚至死亡.培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时,细胞代谢与温度成正比;人体细胞在39-40℃1小时,即能受到一定损伤,但仍有可能恢复;在40-41℃1小时,细胞会普遍受到损伤,仅小半数有可能恢复;41-42℃1小时,细胞受到严重损伤,大部分细胞死亡,个别细胞仍有恢复可能;当温度在43℃以上1小时,细胞全部死亡.相反,温度不低于0℃时,对细胞代谢虽有影响,但并无伤害作用;把细胞放入25-35℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减慢;放在4℃数小时后,再回到37℃培养,细胞仍能继续生长.细胞代谢随温度降低而减慢.当温度降至冰点以下时,细胞可因胞质结冰受损而死亡.但是,如果向培养液中加入一定量的冷冻保护剂(二甲亚砜或甘油),可在深低温下如-80℃或-196℃(液氮)长期保存.
5.合适的气体环境
气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一,所需气体主要有氧气和二氧化碳.氧气参与三羧酸循环,产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分.开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中.二氧化碳既是细胞代谢产物,也是细胞生长繁殖所需成分,它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值.大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4,偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响.但细胞耐酸性比耐碱性大一些,在偏酸环境中更利于细胞生长.但有一些细胞也喜欢偏碱环境中生长,如成纤维细胞最适合pH是7.4-7.6.每种细胞都有其最适pH值.
体外培养细胞时需要提供那些物质和什么样的环境条件?
充足的营养供给,适宜的温度、适宜的PH和气体环境。环境条件需要是无菌和无毒的环境。希望能帮到你~
体外培养细胞时需要提供那些物质和什么样的环境条件?
体外长期培养的细胞大多需要血浆、血清或胚胎浸出液,而这类培养基都可能含有微量的激素、维生素及必要的氨基酸,足以供给细胞营养的需要。 体外培养细胞的生长所需的基本营养物质,除糖类、氨基酸和脂类三大类营养物质外,也需要一定量的无机盐、维生素和微量元素等。环境条件: 1.实验室 细胞培养是一种无菌...
体外培养细胞时需要提供哪些物质
体外培养细胞时需要提供物质包括:营养物质、生长环境以及必要的生长因子。1. 营养物质:这是细胞生存和生长的基础。主要包括葡萄糖、氨基酸和脂肪酸等,这些都是细胞进行代谢活动所必需的。此外,还需要一些维生素、矿物质和微量元素,它们参与细胞内的多种生化反应,对细胞的正常生理功能至关重要。2. 生长...
细胞培养需要哪些基本条件
因此,在体外培养细胞时必须保持细胞生存环境无菌无毒及时清除细胞代谢产物。4、恒定的细胞生长温度维持培养细胞旺盛生长必须有恒定适宜的温度。5、合适的气体环境气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一。所需气体主要有氧 气和二氧化碳。
细胞生长的影响因素
气体环境和pH,体外培养细胞需要理想的气体环境,氧和二氧化碳是细胞生存必须的条件之一。有些细胞在低氧条件下,可借糖酵解取得能量,但多数细胞低氧时不能生存。氧张力通常维持在略低于大气状态,若氧分压超过大气中氧的含量可能对有些细胞有害。渗透压,细胞在高渗溶液或低渗溶液中,可以立即发生皱缩或...
细胞培养注意事项 细胞培养注意事项有什么
1、无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内,解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵,但细胞在体外培养的过程中,缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖,必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和...
一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件①无毒的环境 ②无菌的环境...
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细胞的生长需要外界环境怎么样
细胞的生长需要外界环境无污染环境、基质、气体环境和氢离子浓度、液相环境。细胞的营养需要:1、基本营养物质:氨基酸,维生素,葡萄糖、核糖、脱氧核糖等,无机离子等;2、促细胞生长因子:多由血清提供。细胞的生存环境:1、温度条件:不同生物来源的组织细胞培养温度不同;体外培养动物细胞最常用的温度是...
一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件( )①无毒的环境 ②无菌...
①动物细胞培养需要无毒环境,故①正确;②动物细胞培养需要无菌环境,故②正确;③用于动物细胞培养的合成培养基需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,还需加入血清、血浆等天然物质.故③正确;④动物细胞培养需要适宜的温度和PH,其中温度要与动物体温相近,故④正确;⑤动物细胞培养需要一定...
细胞培养注意事项
细胞培养需要满足无毒和无菌条件。细胞在活体内拥有解毒系统和免疫系统保护,但体外培养时,它们丧失了防御能力和解毒能力,因此必须确保工作环境无菌,个人卫生良好,试剂和培养基无菌,以及操作无菌。微生物污染常见于体外培养,包括支原体、细菌和真菌。其中,支原体虽无致命毒性,却能长期影响细胞,体积小且不...