夹心法ELISA空白特别大
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发布时间：2023-05-26 06:04
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时间：2024-09-30 15:39
阳性对照呢？
如果二抗质量很差，即效价低、使用浓度高就会如此。建议增加coating、减少1st AB 和2nd Ab的浓度。追问阳性对照正常，就是空白值大，酶标二抗是promega的，我现在是用1:10000稀释，质量也应该没问题。。我又试了空白不加检测抗体，因为之前我觉得是我的兔抗和鼠抗之间有些非特异性吸附，结果还是有颜色，只不过颜色相对浅了点，那是不是意味着我的捕获抗体和羊抗鼠酶标二抗有一些非特异性的相互作用啊！是不是说明我的兔抗不太好？求指点。。
追答还有酶标板也很关键，不同性质的酶标板非特异性吸附不同。可以同时试一试其它公司的酶标板。如康宁、不同国产板做对照试验。我们以前用使用了很多种，最后康宁的最好。
用双抗夹心ELISA法做HCV检测时 空白对照结果明显大于阴性结果,为什么啊...
如果你说的空白指的是BLANK+酶>阴性标本，有两种可能，一种为该孔污染，一种为你的酶标抗原或二抗（如果你检测的HCV抗体）与你的包被原料有交叉反应且你的板封闭效果不好，而你加入阴性标本后37度反应30min—60min？的时间里阴性血清相当于第二次封闭所以可使其N+E<B+E ...
夹心法ELISA的阴性对照,空白对照有何意
阴性值一般比较接近空白值,设置阴性对照,主要还是排除所加样品里有没有其他物质对实验干扰引起显色,导致所测值偏高。
ELISA的方法有哪些
ELISA实验所有方法的缺点很明显：1、重复性不好；2、收自身抗体、嗜异性抗体等干扰，易出现假阳性；3、不论仪器和手工操作，干扰因素较多。影响最大的是温度和时间。1、直接法（directELISA）将抗原直接固定在固相载体上，参加酶符号的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。优势：操...
用夹心板检测抗原含量(ELISA法),同一批样品结果却差别比较大,影响因 ...
样本在被加入plate前是否混匀充分？蛋白保存方法对不对？最好不要反复冻融。是自己提前coat的板子吗还是kit中已经pre-coated的板子？凭个人经验，自己coat也会产生well与well之间的差异。
为什么夹心法ELISA的显色结果与待检抗原(或抗体)的量成反比?
夹心法ELISA的显色结果与待检抗原（或抗体）的量成反比的原因是，当待检抗原（或抗体）的浓度较低时，它们与二抗结合的可能性较小，因此在加入检测抗体和显色底物之后，所产生的颜色强度会减弱，导致显色信号较弱或者不显色。相反，当待检抗原（或抗体）浓度较高时，它们能够与二抗结合的概率较大，...
ELISA方法的优缺点
ELISA方法：操作简单、快速、敏感性高、特异性强、实验设备要求简单、应用范围广泛、无放射性污染、能定性及半微量、微量、超微量定量分析，是目前应用最广，发展最快的酶免疫学技术方法。竞争法：可测Ag，也可测Ab，特点是：结合于固相的酶标Ag/Ab量与受检Ag/Ab的量是呈反比的。夹心法：是测Ag最...
艾滋病潜伏期如何通过检测确定一个人感染艾滋病
但它是确认HIV感染的黄金标准。确定感染状态需要结合多个检测结果，如快速检测阴性但存在不确定性时，可能需要使用两种或以上试剂进行复核。我国血液筛查和常规检测通常采用抗体夹心ELISA法，偏远地区或特殊情况可能采用快速法。阳性结果需要进一步确认，通常通过两种不同原理或厂家的试剂复测，以确保准确性。
elisa试剂盒操作步骤
以下是两种Elisa试剂盒的操作步骤:方法一：双抗体夹心法 包被：将抗体稀释至1～10μg/ml，用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液。每反应孔加入0.1ml，4℃过夜。次日，弃去溶液，用洗涤缓冲液洗涤3次。加样：取一定稀释的待检样品0.1ml加入反应孔，37℃孵育1小时后洗涤。同时制作空白、阴性对照和阳性...
ELISA法检测抗原的双抗体夹心法的一些困惑
我也问过这个问题。听别人给我解释，说可以直接标记在一抗上然后加底物显色，但是那样的话，放大效果没有加二抗的好。
Elisa方法中的竞争法与夹心法的区别
1、检测范围不同 竞争法一般用于检测无法同时与两种抗体结合的小分子抗原；夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。2、检测原理不同 竞争法的检测原理为：受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合，因此结合于固相的酶标抗原量与受检...
