各种引物探针设计软件计算出来的Tm值该怎么考虑？相差太大。如primer 5、primer express、oligo等。

发布网友发布时间：2022-04-24 03:50

共2个回答

热心网友时间：2023-10-26 01:49

正常primer5设计引物时，Tm在40~70之间都没有问题，基本在PCR时候按照引物合成公司给的TM值进行试验，都没有问题！除非你的引物设计的有问题。

热心网友时间：2023-10-26 01:50

要看一下你的参数设置，比如primer5 中的File-》preferences，其中的盐离子浓度，镁离子浓度，引物浓度等。这些值不同计算出来的Tm值就相差很大。

热心网友时间：2023-10-26 01:49

正常primer5设计引物时，Tm在40~70之间都没有问题，基本在PCR时候按照引物合成公司给的TM值进行试验，都没有问题！除非你的引物设计的有问题。

热心网友时间：2023-10-26 01:50

要看一下你的参数设置，比如primer5 中的File-》preferences，其中的盐离子浓度，镁离子浓度，引物浓度等。这些值不同计算出来的Tm值就相差很大。

热心网友时间：2023-10-26 01:49

正常primer5设计引物时，Tm在40~70之间都没有问题，基本在PCR时候按照引物合成公司给的TM值进行试验，都没有问题！除非你的引物设计的有问题。

热心网友时间：2023-10-26 01:50

要看一下你的参数设置，比如primer5 中的File-》preferences，其中的盐离子浓度，镁离子浓度，引物浓度等。这些值不同计算出来的Tm值就相差很大。

热心网友时间：2023-10-26 01:49

正常primer5设计引物时，Tm在40~70之间都没有问题，基本在PCR时候按照引物合成公司给的TM值进行试验，都没有问题！除非你的引物设计的有问题。

热心网友时间：2023-10-26 01:50

要看一下你的参数设置，比如primer5 中的File-》preferences，其中的盐离子浓度，镁离子浓度，引物浓度等。这些值不同计算出来的Tm值就相差很大。