影响动物实验效果的动物实验技术因素有哪些
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发布时间:2023-02-03 07:20
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时间:2024-11-18 19:30
一、动物选择
选择好适合研究需要的实验动物是获得正确实验结果和实验成功的重要环节。应按照不同实验的要求选择合适的动物。如作肿瘤的研究工作,就必须了解哪种动物是高癌种,哪种是低癌种,各种动物自发性肿瘤的发生率是多少。如A系、C3H系、AKR系、津白Ⅱ等小鼠是高癌品系小鼠,C3H/He系经产雌鼠有80~100%的自发性乳腺癌。AKR系8~9月龄小鼠有80~90%自发性血病。C57BL系、津白Ⅰ等小鼠是低癌品系小鼠。不同动物对同一因素的反应虽然往往是相似的,但也常常会遇到动物出现特殊反应的情况。如5岁以上的雌狗常自发性乳腺肿瘤,如果给雌狗孕激素,就更容易诱发乳腺肿瘤。雌激素还容易引起狗发生贫血,这在其它实验动物是很少见的。怎样选择好实验动物可参看实验动物的选择和应用一讲。
二、实验季节
生物体的许多功能随着季节产生规律性的变动。目前已有大量资料表明,动物对化学物作用的反应也受到季节的影响。例如在春、夏、秋、冬分别给10只大鼠注入一定量的巴比妥纳,发现入睡时间以春季最短。秋季最长,而睡眠时间则相反,春季最长,秋季最短(见表11-19)。
表11-19 大鼠对巴比妥纳反应的季节变动
季 节入睡时间(分)睡眠时间(分)
春56.1±11.0470±34.0
夏93.5±11.3242±14.3
秋120.0±19.0190±18.7
冬66.5±8.2360±33.0
不同实验季节,动物的机体反应性有一定改变。如不同季节对辐射效应有影响。家兔的放射敏感性在春夏两季升高,秋冬两季降低。在狗的实验中,在春、夏两季照射后的死亡率比秋、冬为高。小鼠的放射敏感性,在冬季和补夏显著升高,而初夏和夏季则降低。大鼠的放射敏感性则没有明显的季节性波动。因此,这种季节的波动在进行跨季度的慢性实验时必须注意的。
三、昼夜过程
机体的有些功能还有昼夜规律性变动。例如有人给小鼠皮下重复注入40%的四氯化碳溶液0.2ml后,在同一天不同的时间将动物处死,观察肝细胞的有丝*动态,以了解肝细胞变性的修复情况。结果列于表11-20。资料表明,小鼠肝细胞有丝裂的昼夜变动十分明显。
表11-20 小鼠肝细胞有丝*系数(‰)的昼夜变动
分组昼 夜 的 钟 点
024678910
实验组2.4±1.22.6±1.21.02±0.174.11±0.270.26±0.061.36±0.250.66±0.250.57±0.08
对照组2.8±1.862.6±0.160.2±06.3±1.480.46±0.070.26±0.070.97±0.050.66±0.04
动物对照射的敏感性在昼夜间有不同的变化,这种变化见于不同性别、种系和年龄的小鼠和大鼠。白天放射敏感性降低(死亡较少,LD50/30较高,体重下降较少,肝脏损伤较轻)夜间升高。同时,在小鼠和大鼠实验中,除了夜间(21~24点)的高峰外,还发现白天(小鼠9~12点,大鼠15点)损伤加重情况。下午和后半夜射敏感性最低。大鼠与小鼠不同,其放射敏感性虽有昼夜间的明显波动,但不很剧烈。经实验证明实验动物的体温、血糖、基础代谢率、内分泌激素的分泌均发生昼夜节律性变化。因此这类实验的观察必须设有相应的对照,并注意实验中某种处理的时间顺序结果的影响。为了得到可比性的实验结果,所有实验组动物应在同一时间内进行照射或其它实验处理。
四、麻醉浓度
动物实验中往往需要将动物麻醉后才能进行各种手术和实验。要求麻醉浓度要适度,而且在整个实验过程中要保持始终恒定。因此不能不分别实验要求和动物品种(或品系)而用同一种麻醉剂,也不能乱用麻醉剂。因为不同的麻醉剂有不同的药理作用和副作用,应根据实验要求与动物种类而加以选择,使用合适。麻醉浓度的控制是顺利完成实验获得正确实验结果的保证。如果麻醉过深,动物处于浓度抑制,甚至濒死状态,动物各种正常反应受到抑制,那是不会做出可靠的实验结果的。麻醉过浅,在动物身上进行手术或实验,将会引起强烈的疼痛刺激,使动物全身,特别是呼吸,循环功能发生改变,消化功能也会发生改变,如疼痛刺激会反射性的长时间中止胰腺的分泌。所以麻醉浓度必须合适。由此也不难理解在整个实验中保持麻醉浓度的始终一致是如何必要了,因为麻醉浓度的变动,会使实验结果产生前后不一致的变化,给实验结果带来了难以分析的误差。
五、手术技巧
动物实验中除了要注意选择合适的实验动物,用的试剂要纯粹,仪器要灵敏,方法要准确外,还必须注意手术技巧,即操作技术的熟练。手术熟练可以减少对动物的刺激,动物受的创伤、