te溶液能使蛋白质变性吗
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发布时间:2022-12-19 06:44
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热心网友
时间:2023-09-20 10:09
可以。
TE缓冲液是由Tris和EDTA配制而成,主要用于溶解核酸,能稳定储存DNA和RNA。TE缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。PH缓冲系统对维持生物的正常pH值,正常生理环境起重要作用。多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动,而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。在生物体中有三种主要的pH缓冲体系,它们是蛋白质、重碳酸盐缓冲体系和磷酸盐缓冲体系。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的
热心网友
时间:2023-09-20 10:09
te溶液能使蛋白质变性吗?
答:te溶液一般不能使蛋白质变性。
因为蛋白质变性一般会沉淀,所以如果沉淀了就会变性,但是是否沉淀与pH值也有关系。Tris-EDTA,属于生物碱试剂,加多EDTA可以改变溶液酸碱性,可能并不会沉淀。
热心网友
时间:2023-09-20 10:10
某些有机溶剂也能使蛋白质变性。蛋白质变性后,就丧失了原有的可溶性
DNA提取常规溶液中,浸泡缓冲液,STE缓冲液,TE缓冲液,蛋白酶K,EDTA,SDS...
蛋白酶K是分解蛋白质的,免除了实验中蛋白质的干扰;EDTA主要是二价离子的鳌合剂,像Mg离子是DNA酶的辅酶,用EDTA将其鳌合,避免了DNA酶的干扰;TE溶液主要是用来保存你提取的DNA;SDS主要是裂解血红细胞的;至于浸泡缓冲液、STE缓冲液我到没用过,希望我说的会对你有用。
哪些重金属离子可以使蛋白质变性
蛋白质受热到一定温度就会发生不可逆的凝固,凝固后不能在水中溶解,这种变化叫做变性。除了加热以外,在紫外线、X射线、强酸、强碱,铅、铜、汞等重金属的盐类,以及一些有机化合物如甲醛、酒精、苯甲酸等作用下,蛋白质均能发生变性。蛋白质变性后,不仅丧失了原有的可溶性,同时也失去了生理活性。重金...
苯酚氯仿抽提dna原理
苯酚/氯仿提取DNA是利用酚是蛋白质的变性剂,反复抽提,使蛋白质变性,SDS(十二烷基磺酸钠)将细胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白质或多肽或小肽分子,核蛋白变性降解,使DNA从核蛋白中游离出来。苯酚/氯仿提取DNA是利用酚是蛋白质的变性剂,反复抽提,使蛋白质变性,SDS(十二烷基磺酸钠)将细胞膜...
大提质粒为什么质粒很难溶解在te中
手提的话,加入TE溶解的应该不是质粒,而是残余的变性蛋白质.问题不会出在TE,TE是水溶液,核酸是非常容易溶解的物质.顺便,小量质粒提取的话,纯度很好的质粒沉淀是肉眼不可见的,如果是明显的白色物质,就根本不是质粒而是蛋白质残余.你要确定你提取的有没有问题,你应该做两个实验,1是用分光光度计测A260...
蛋白质变性中用Tris-HC PH=6.8为什么
Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans核纤层蛋白lamin)的中间纤维的形成。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris...
细菌DNA提取过程中各部药品的作用
酚(Phenol)对蛋白质的变性作用远大于氯仿,按道理应该用酚来最大程度将蛋白质抽提掉,但是水饱和酚的比重略比水重,碰到高浓度的盐溶液(比如4M的异硫氰酸胍),离心后酚相会跑到上层,不利于含质粒的水相的回收;但加入氯仿后可以增加比重,使得酚/氯仿始终在下层,方便水相的回收;还有一点,酚与水有...
DNA提取过程中的关键步骤及注意事项有哪些
45℃烘箱烘干15-30min,用双蒸水沿管壁沿四周冲洗(TE量视DNA沉淀量而定,在80-250ul之间),溶解12-24h,-20℃保存备用。注意事项:1、 裂解液要预热,以抑制DNase,加速蛋白变性,促进DNA溶解。2、 酚一定要碱平衡。苯酚具有高度腐蚀性,飞溅到皮肤、粘膜和眼睛会造成损伤,因此应注意防护。氯仿易燃...
CTAB法提取DNA的原理,要详细些
使蛋白质变性,同时抑制了DNase的降解作用。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。使用酚的优点:1.有效变性蛋白质;2抑制了DNase的降解作用。缺点:1.能溶解10-15%的水,从而溶解一部分poly(A)RNA。2.不...
SDS能不能使DNA变性很多人都说SDS不能使D
基本不会 SDS是表面活性剂,但是对DNA结构的影响较小。可以用SDS法裂解细胞膜,使蛋白质变性,进而抽提DNA~NA会迅速被降解,因为最终溶解质粒的TE缓冲液中有EDTA。如果哪天你手上正好缺了溶液I,可不可以抽提质粒呢?实话告诉你,只要用等体积的水,或LB培养基来悬浮菌体就可以了。有一点不能忘的是...
萝卜能做DNA的粗体取实验么?步骤是什么?
用这种方法处理时,蛋白质停留在水相和氯仿相中间,而 DNA则溶于上层水相,用两倍体积95%乙醇溶液可将DNA钠盐沉淀出来。② 用 十二烷基硫酸钠(SDS)等去污剂使蛋白质变性,从而使其与核酸分离,也可 从材料中直接提取出DNA。③ 用苯酚处理,然后离心分层,一样可以将DNA 与蛋白质分离开来。这时DNA溶于...