什么是氮代谢类生理生化检测服务?
发布网友
发布时间：2022-12-21 05:37
共1个回答
热心网友
时间：2023-10-05 10:26
一、氮代谢是什么？
氮代谢是氨的同化及蛋白质等有机氮化合物的合成、分解的转化过程。同时它也是植物的基本生理过程之一，参与地球化学循环的重要组成部分，植物氮素同化的主要途径是经过*还原为铵后直接参与氨基酸的合成与转化，期间硝基还原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酰胺合酶(GOGAT)、天冬酰胺转氨酶(AspAT)等关键酶参与了催化和调节，以氨基酸为主要底物在细胞中合成蛋白质，再经过对蛋白质的修饰、分类、转运及储存等，成为植物有机体的组成部分，同时与植物的碳代谢等协调统一，共同成为植物生命活动的基本过程。
氮代谢=摄入氮－排出氮（粪氮+尿氮+经皮肤排出的氮）
二、怎么检测氮代谢？
氮代谢是指氮素及含氮物质的同化、异化和排泄，总称为氮素代谢。我们采用Agilent 1260 Infinity型高效液相色谱仪对样品进行分离，结合DAD检测器对样品进行鉴定或采用Thermo Scientific的U3000快速液相色谱对样品进行分离，结合Thermo Scientific™ Q Exactive™对样品进行鉴定，可高效、精准的检测氮代谢物的含量变化。目前可检测的氮代谢物包括尿素、肌氨酸酐、肌酸等。对于常见氮代谢物或以上氮代谢物的同类物质，可结合标样进行检测，对于稀有的氮代谢物分子，如提供标准样品，百泰派克可提供定制检测。对于氮代谢过程所需要的关键酶，百泰派克可提供试剂盒测定服务。
三、样品制备
植物氮代谢物的提取方法（此部分涉及到公司的核心工艺，以下提供常规的提取工艺）
1）称量约20 mg的样品；
2）液氮研磨；
3）加入2 mL的甲醇超声提取30 min;
4）离心，取1.5 mL滤液；
5）旋干，加入0.5 mL甲醇复溶；
6）0.45 μm的微孔滤膜过滤，用HPLC-MS检测。
动物氮代谢物的提取方法(以尿液为例)：
1）取新鲜的晨尿2 mL；
2）8000 rpm离心5 min；
3）取1.5 mL上清液；
4）用乙酸铵缓冲液稀释10倍；
5）0.45 μm的微孔滤膜过滤，用HPLC检测
