氨基酸层析有两个点怎么办
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发布时间:2023-05-07 22:25
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时间:2024-03-20 20:44
氨基酸的纸层析 一、 实验目的 1.了解并掌握氨基酸纸层析的原理和方法.2.学习纸层析法的操作技术,分析未知样品氨基酸的成分.二、 实验原理 用滤纸为支持物进行层析的方法,称为纸层析法,它是分配层析法的一种.纸层析所用的展层溶剂大多是由水饱和的有机溶剂组成.滤纸纤维的—OH 基的亲水性基团,可吸附有机溶剂中的水作为固定相,有机溶剂作为流动相,它沿滤纸自下向上移动,称为上行层析;反之,使有机溶剂自上而下移动,称为下行层析.将样品点在滤纸上进行展层,样品中的各种氨基酸即在二相中不断进行分配,由于它们各自的分配系数不同,故在流动相中移动速率不等,从而使不同的氨基酸得到分离和提纯.纸层析法主要是依据混合组分对二相分配系数的差异进行分离,但亦存在着某种程度的吸附作用和离子交换现象.氨基酸经层析在滤纸上形成距原点不等的层析点,氨基酸在滤纸上的移动速率用Rf 表示.Rf = 原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离 只要实验条件(如温度、展层溶剂的组分、pH、滤纸的质量等)不变,Rf 值是常数,因此可做定性分析参考.如果溶质中氨基酸组分较多或其中某些组分的Rf 值相同或近似,用单向层析不宜将它们分开,为此可进行双向层析,在第一溶剂展开后将滤纸转动90度,以第一次展层所得的层析点为原点,再用另一种溶剂展层,即可达到分离目的.由于氨基酸无色,可利用茚三酮反应使氨基酸层析点显色,从而定性和定量.三、仪器和试剂 仪器 层析滤纸、烧杯、剪刀、层析缸、培养皿、猴头喷雾器、微量加样器或毛细管、吹风机一个、直 尺、铅笔等.试剂 1.混合氨基酸溶液(水解后的氨基酸干粉) 甘氨酸溶液:50mg 甘氨酸溶于5mL 水中.蛋氨酸溶液:25mg 蛋氨酸溶于5mL 水中.亮氨酸溶液:25mg 亮氨酸溶于5mL 水中.氨基酸混合液:甘氨酸50mg,亮氨酸25mg,蛋氨酸25mg 共溶于5mL 水中.2.展层溶剂 碱相溶剂:
层析法分离氨基酸的原理是?详细说明,谢谢
二、原理
纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分 配层析法,其中滤纸纤维上吸附的水是固定相 水是固定相, 配层析法,其中滤纸纤维上吸附的水是固定相, 展层用的有机溶剂是流动相 在层析时, 有机溶剂是流动相。 展层用的有机溶剂是流动相。在层析时,
将样品点在距滤纸一端约2~ 的某一处, 将样品点在距滤纸一端约 ~3cm的某一处, 的某一处 该点称为原点; 该点称为原点;然后在密闭容器中层析溶剂 沿滤纸的一个方向进行展层, 沿滤纸的一个方向进行展层,这样混合氨基 酸在两相中不断分配。由于分配系数( 酸在两相中不断分配。由于分配系数(Kd) 不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上。 不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上。 物质被分离后在纸层析图谱上的位置, 物质被分离后在纸层析图谱上的位置,可用 比移值( 来表示。 比移值(Rf)来表示。 所谓R 是指在纸层析中, 所谓 f,是指在纸层析中,从原点至氨基酸 停留点(又称为层析点)中心的距离( ) 停留点(又称为层析点)中心的距离(X)与 原点至溶剂前沿的距离( )的比值。 原点至溶剂前沿的距离(Y)的比值。如图
原点到层析点中心的距离 X Rf = = Y 原点到溶剂前沿的距离
在一定条件下(如温度、展层剂的组成、 在一定条件下(如温度、展层剂的组成、 层析纸质量等不变),某种物质的R ),某种物质的 层析纸质量等不变),某种物质的 f 值是常 因此可作为定性依据。 数,因此可作为定性依据。 由于氨基酸无色, 由于氨基酸无色,可利用茚三酮反应使 氨基酸层析斑点显色,从而作定性分析。 氨基酸层析斑点显色,从而作定性分析。本 实验利用纸层析法分离氨基酸。 实验利用纸层析法分离氨基酸。
定性鉴定20种氨基酸的双向纸层析是 A交换层析 B亲合层析 C分配层析 D薄层层析
您好!答案是C分配层析。
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层析法分离氨基酸的原理是?
二、原理
纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分 配层析法,其中滤纸纤维上吸附的水是固定相 水是固定相,配层析法,其中滤纸纤维上吸附的水是固定相,展层用的有机溶剂是流动相 在层析时,有机溶剂是流动相.展层用的有机溶剂是流动相.在层析时,
将样品点在距滤纸一端约2~的某一处,将样品点在距滤纸一端约 3cm的某一处,的某一处 该点称为原点; 该点称为原点;然后在密闭容器中层析溶剂 沿滤纸的一个方向进行展层,沿滤纸的一个方向进行展层,这样混合氨基 酸在两相中不断分配.由于分配系数( 酸在两相中不断分配.由于分配系数(Kd) 不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上.不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上.物质被分离后在纸层析图谱上的位置,物质被分离后在纸层析图谱上的位置,可用 比移值( 来表示.比移值(Rf)来表示.所谓R 是指在纸层析中,所谓 f,是指在纸层析中,从原点至氨基酸 停留点(又称为层析点)中心的距离( ) 停留点(又称为层析点)中心的距离(X)与 原点至溶剂前沿的距离( )的比值.原点至溶剂前沿的距离(Y)的比值.如图
原点到层析点中心的距离 X Rf = = Y 原点到溶剂前沿的距离
在一定条件下(如温度、展层剂的组成、 在一定条件下(如温度、展层剂的组成、 层析纸质量等不变),某种物质的R ),某种物质的 层析纸质量等不变),某种物质的 f 值是常 因此可作为定性依据.数,因此可作为定性依据.由于氨基酸无色,由于氨基酸无色,可利用茚三酮反应使 氨基酸层析斑点显色,从而作定性分析.氨基酸层析斑点显色,从而作定性分析.本 实验利用纸层析法分离氨基酸.实验利用纸层析法分离氨基酸.