巴氏染色染完后不小心放进反蓝液之后该怎么办
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发布时间:2023-05-05 15:00
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热心网友
时间:2023-11-06 14:54
巴氏染色的操作方法
染色有4个步骤:1、固定;2、核染色;3、胞浆染色;4、透明。
主要达到以下要求:1、核的结构清晰;2、透明度高;3、分色恰当。
一、固定
1、固定的目的
细胞制片的迅速固定是制片过程中关键的一步,否则会影响细胞学诊断的准确性。对于不同的标本需要不同的固定方法。最为常用的固定方法是95%酒精作为固定液的湿固定法。酒精作为一种脱水剂能够防止细胞内的酶将蛋白质分解而自容,并凝固细胞内的物质如蛋白质、脂肪和糖类等,使其保持与组织生活相仿的成分,从而使细胞各部分,尤其核染色质易于着色。对于巴氏染色来说,酒精固定最为重要的。如果酒精浓度不足引起的固定不佳,可造成细胞的人为变化,并可导致假阳性或假阴性的诊断。
2、固定方法
湿固定法:作为用95%酒精固定液固定的细胞学标本一定使用湿固定法。制片制备完后,趁标本新鲜而又湿润时,立即放入盛有95%酒精的固定缸内。制片在固定液内至少保持15-30min。固定时间通常不超过1周。这种制片染色后,颜色鲜艳,结构清晰。
如果细胞制片需要送至另一实验室或邮寄他处染色时,可以固定15min后,把制片取出后立即密封的容器中或者使用甘油防止制片干燥。因为无论固定前或固定后的制片,如果发生干燥后都会影响染色的效果。
3、固定注意事项
固定液的过滤:为了防止细胞污染,凡是使用过的固定液,必须过滤后才能再使用。使用过长的固定液,必须用酒精相对密度计测定,酒精浓度低于90%时应该及时更换新液。
湿固定的重要性:标本再新鲜时及时固定时保证染色效果的重要因素。如苏木素对细胞核的染色,巴氏染色中胞浆的特殊着色作用,均可因标本干燥后固定而大受影响。
制片标本的邮寄:标本再固定15min后取出,立即加甘油数滴于制片上,装入密封的小盒中。实验室在收到标本后,先浸入95%酒精中,使甘油溶去,再进行染色。
二、核染色
1、苏木素液浸染时间一般在3-5min,但是必须随气温和染料情况而酌情改变。夏季或放置较久的苏木素染液容易着色,时间要缩短;冬季或新配制的苏木素染液和应用已久较稀释的苏木素液不易着色,时间要延长。在使用苏木素染色时,一般有2种方法:1)过染法:首先有意识地进行深染,然后通过盐酸酸化过程使核染色趋于合适。这种方法能够在酸化过程中把胞浆内黏附多余的苏木素染料去掉,使胞浆染色更为鲜艳、清晰、多用于黏液多的标本。2)淡染法:在核染色过程中,严格掌握染色时间,使核染色适宜而不用盐酸酸化,但是胞浆中少量的苏木素会影响EA染色的质量。主要用于黏液少的标本,避免在酸化和自来水冲洗的过程中使细胞成片地脱落。
在使用苏木素染色时,一定要每日进行过滤,否则苏木素结晶会影响染色的质量。一般苏木素染液可以使用较长时间,所以每日增加少量新鲜染液即可。
2、碱化碱化亦称返蓝过程,可以使用饱和碳酸锂或3%氨水碱化,目的使苏木素及早显色,时间约数秒。更重要的是流水冲洗,可使蓝色显的更鲜艳。碱性溶液亦需要充分漂清才不会妨碍下一步的胞浆着色及标本制成后的颜色保存。分化和碱化溶液至少每天更换新液。
热心网友
时间:2023-11-06 14:54
衣服使用84消毒液变黄,可去干洗店尝试使用保险粉(连二亚硫酸钠)还原。2、84消毒液具有较强的漂白功能,对有色衣服会退色,要谨慎使用,使用时水的比重要大
1、若衣服使用84消毒液变黄,可去干洗店尝试使用保险粉(连二亚硫酸钠)还原。
2、84消毒液具有较强的漂白功能,对有色衣服会退色,要谨慎使用,使用时水的比重要大些。用84消毒液漂洗白色或浅色的衣物,和洗能恢复染色的白色衣服较好回。
3、将染上色的衣服放进盆里,要是染色的范围小,可只把染色的地方放进小盆里,只在染色的地方倒上烧开的水打湿答,要是染色的范围大、多,就全把衣服放进盆里,倒上烧开的水再倒进一些84消毒液,量要大一些。10-15分钟就会恢复原色。
热心网友
时间:2023-11-06 14:55
如果细胞制片需要送至另一实验室或邮寄他处染色时,可以固定15min后,把制片取出后立即密封的容器中或者使用甘油防止制片干燥