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RT-PCR,自己前后引物Tm差7度,前引物63度,后引物58度,退火温度如何设置?

发布网友 发布时间:2023-05-03 01:40

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2个回答

热心网友 时间:2023-10-17 11:17

就就低不就高,因为温度高了会使低退火温度的引物掉下来,但是低温度不影响高退火温度的引物结合,但有可能会有非特异扩增。58度肯定可以跑出来,结果如何都是要跑胶看一看再作调整。
PS:不管引物公司给的退火温度是多少,自己回来都是要跑着看一看的。

热心网友 时间:2023-10-17 11:17

你rtpcr是一步法还是两步法?
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