发布网友 发布时间:2023-04-13 09:55
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热心网友 时间:2023-10-09 09:06
1、加去离子水将溶液与5×转膜液中。1、加去离子水将溶液与5×转膜液中。2、定容至1L后,室温保存即可。稀释,英文是dilution,指对现有溶液加入更多溶剂而使其浓度减小的过程。
求western blot 电泳液和转膜缓冲液的配方~~谢谢啦~~ 有的转移缓冲液加...5*SDS-PAGE电泳缓冲液 0.125M tris 15.1g, 1.25M glycine 94g,0.5% SDS 5.0g,加入800ml去离子水,搅拌溶解。加去离子水将溶液定容至1L后,室温保存。用的时候稀释成1*的就可以了。转膜缓冲液的配制方法:39mM glycine 2.9g,48mM tris 5.8g, SDS 0.37g 加入600ml去离子水,充分搅拌溶...
western blot电泳液和转膜液的配方在哪里可以购买使用时,直接用双蒸水稀释五倍(100ml缓冲液+400ml双蒸水,混匀,常温保存)。一般此电泳液可反复使用三到五次,如果发现有明显沉淀或者漂浮时,请丢弃换新的。10×电转液 (1L)所需试剂 : Tris,甘氨酸和SDS 配方: 30.3g Tris 144g 甘氨酸 3.7 g SDS (如有必要可加)。用80...
转膜液稀释大了会怎么样导致蛋白跑出杂带。根据查询百度健康信息显示,转膜液稀释过大会导致蛋白跑出杂带,影响结果,还会使蛋白质难以转移,降低转膜效率,不要自行稀释转膜液。
2XSSC是什么分子杂交时转膜缓冲液,为0。3mol/L NaCl,0.03mol/L柠檬酸钠.3H2O,PH为7.0,使用时等体积稀释,比如,你要用500ml转膜缓冲液,得去250ml2XSSC。不过,由于使用量比较大,我都配置成20倍。
急切求解WB,IHC的意思!1、用0.01M PBS洗膜,5min ×3次。 2、加入包被液,平稳摇动,室温2hr。 3、弃包被液,用0.01M PBS洗膜,5min×3次。 4、加入一抗(按合适稀释比例用0.01M PBS稀释,液体必须覆盖膜的全部),4℃ 放置12hr以上。阴性对照,以1%BSA取代一抗,其余步骤与实验组相同。 5、弃一抗和1%BSA,用0.01M PBS分别洗膜,...
凝胶迁移实验(EMSA) 的原理及实验方案详解使用时稀释10倍 即为1×TBE Buffer。 (1)设计重组引物TF-F,R,进行PCR扩增,PCR产物纯化回收。 (2)使用NEB限制性内切酶将pet28a载体线性化,并进行纯化回收。 (3)利用重组试剂盒进行重组反应(Vazyme, C112-02)。 (4)将反应体系加入DH5α感受态中,进行转化,涂板,挑斑检测。挑选阳性菌液过夜培养,提质粒,-20...
western-blot实验步骤(1) 参考二抗的说明书,按照适当比例用Western二抗稀释液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。(2)用微型台式真空泵吸尽洗涤液,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在侧摆摇床上缓慢摇动孵育一小时。(3)回收二抗。加入Western洗涤液,在侧摆摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液...
western blot的具体步骤?1、用0.01M PBS洗膜,5min ×3次。2、加入包被液,平稳摇动,室温2hr。3、弃包被液,用0.01M PBS洗膜,5min×3次。4、加入一抗(按合适稀释比例用0.01M PBS稀释,液体必须覆盖膜的全部),4℃ 放置12hr以上。阴性对照,以1%BSA取代一抗,其余步骤与实验组相同。5、弃一抗和1%BSA,用0...
westernblot试验中遇到的问题,希望能帮到正在苦恼的你~3. 跑胶前,需进行蛋白浓度检测,若浓度偏低,可能是蛋白提取不成功。4. 转膜后,使用丽春红染色,若观察到明显的蛋白条带,说明转膜效果良好。5. 显色后,检测内参和目的蛋白的表达情况。6. 若蛋白未完全变性,应提高SDS浓度并延长煮沸时间。7. 若蛋白浓度过高,应加入缓冲液稀释至适宜浓度。8. ...