ELISA 标准曲线横坐标可以是OD值吗?
发布网友
发布时间：2023-04-28 16:52
共2个回答
热心网友
时间：2023-10-29 07:32
我只对前一个问题比较有把握：楼主的想法是对的，改换坐标系的选取不会改变浓度与吸光度的关系，两种方式所得结果应无差别。
后面一个问题我其实对其中的数学原理理解很浅显，个人的理解如下：
在理想状态下，标准曲线呈线性关系，则一阶方程即可以完美拟合。
真实情况常常不完美，容易出现低浓度区间接近最低检出限而趋向平缓，以及高浓度区间接近显色反应信号饱和而趋向平缓的情况。为了拟合，使用二阶方程较为合理。
如果二阶方程都不能够很好地拟合，则我会怀疑实验结果的可靠性，此时，即使提高阶数，仍能够提高拟合，但对得到可靠的标准曲线毫无帮助。即是说，此时你的方程对你这条标准曲线的拟合是很好的，但你这条标准曲线对你其他数据浓度/吸光度的关系的反映很可能是不准确的。
以上的分析并不是很有信心，因为我曾使用过软件中建议的拟合计算方式，与以上完全不同，可能也不是excel能够完成的。不管怎样，楼主有兴趣可以去研究一下：
我在这里链接贴不了，以上截图来自bio-rad。需要的话楼主可以搜索以上标题关键字，也可以私信我。
热心网友
时间：2023-10-29 07:32
关于标准曲线的拟合方式，直线、二次曲线、三次曲线、指数、对数等虽都可用于ELISA标准曲线的拟合，但都只适用于曲线的一部分，有的适用于前半段，有的适用于后半段，有的适用于中间一段，而Logistic曲线则对曲线的全部都有较好的适用性。关键在于你的标准曲线做到了S形的哪一部分，你想检测的样品浓度在曲线的哪一部分。在S曲线的低浓度部分可以用乘幂方程很好的拟合，中低浓度部分可以用直线方程，中间部分可用对数方程，而中后段可用四参数。如果用于定量，还是在中间一段较好。
希望对你有帮助
热心网友
时间：2023-11-20 08:29
我只对前一个问题比较有把握：楼主的想法是对的，改换坐标系的选取不会改变浓度与吸光度的关系，两种方式所得结果应无差别。
后面一个问题我其实对其中的数学原理理解很浅显，个人的理解如下：
在理想状态下，标准曲线呈线性关系，则一阶方程即可以完美拟合。
真实情况常常不完美，容易出现低浓度区间接近最低检出限而趋向平缓，以及高浓度区间接近显色反应信号饱和而趋向平缓的情况。为了拟合，使用二阶方程较为合理。
如果二阶方程都不能够很好地拟合，则我会怀疑实验结果的可靠性，此时，即使提高阶数，仍能够提高拟合，但对得到可靠的标准曲线毫无帮助。即是说，此时你的方程对你这条标准曲线的拟合是很好的，但你这条标准曲线对你其他数据浓度/吸光度的关系的反映很可能是不准确的。
以上的分析并不是很有信心，因为我曾使用过软件中建议的拟合计算方式，与以上完全不同，可能也不是excel能够完成的。不管怎样，楼主有兴趣可以去研究一下：
我在这里链接贴不了，以上截图来自bio-rad。需要的话楼主可以搜索以上标题关键字，也可以私信我。
热心网友
时间：2023-11-20 08:30
关于标准曲线的拟合方式，直线、二次曲线、三次曲线、指数、对数等虽都可用于ELISA标准曲线的拟合，但都只适用于曲线的一部分，有的适用于前半段，有的适用于后半段，有的适用于中间一段，而Logistic曲线则对曲线的全部都有较好的适用性。关键在于你的标准曲线做到了S形的哪一部分，你想检测的样品浓度在曲线的哪一部分。在S曲线的低浓度部分可以用乘幂方程很好的拟合，中低浓度部分可以用直线方程，中间部分可用对数方程，而中后段可用四参数。如果用于定量，还是在中间一段较好。
希望对你有帮助
