流式细胞空白对照 阴性对照 阳性对照分别加什么东西,各自用来做什么
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发布时间：2023-05-08 11:22
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时间：2024-08-17 15:08
一般用荧光标记的抗体染色后，样本有可能会出现两个细胞群，一个阳性，一个阴性的，这样的很好判断。另外一种情况，就是整个细胞群的信号在染色后发生了漂移，但是看不出阳性和阴性的分界。这时候，对照的作用就体现出来了。
所谓空白对照，就是没有用荧光抗体染色的样本，上机检测后，也会得到信号。这时候要调节PMT（也就是检测器）的电压，这样对信号的扩增就会发生变化。这个酶染色的样本，就把信号置于最低的位置。如果是对数比例的信号轴，一般是置于10的3次方以下的位置。
而阴性对照，就是已知没有可被抗体识别靶分子的样本。用荧光抗体染色后，信号应该和空白对照相似。如果有很大的不同，说明抗体的非特异性结合很高，或者染色的步骤有问题。
而阳性对照，就是用已知肯定会有被抗体识别的靶分子的样本。用荧光抗体染色后，应该会出现较强的信号。这个样本有两个作用，一是出现强信号后，可以适当调节PMT的电压，让信号都位于可检测范围之内。另外，如果没有出现预期的信号，那可能是抗体失效，或者染色方法有问题。那检测的其他样本的结果也就无效了。
