有没有做分子的朋友,请教一下一般的pcr扩增用一对引物就行了,
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发布时间：2022-08-12 13:44
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热心网友
时间：2024-08-17 04:35
巢式PCR（nested PCR），是指利用两套PCR引物（巢式引物）对进行两轮PCR扩增反应。
在第一轮扩增中，外引物用以产生扩增产物，此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。
由于巢式PCR反应有两次PCR扩增，从而降低了扩增多个靶位点的可能性（因为与两套引物都互补的引物很少）增加了检测的敏感性；又有两对PCR引物与检测模板的配对，增加了检测的可靠性。
一般应用于动物方面。如：病毒，梅毒螺旋体，HIV，肿瘤基因等
巢式PCR，可以在10的六次方基因组背景下检测到一个拷贝的病毒基因，也不像二次PCR容易产生成片的产物，是效果最好的PCR，但也因此是最容易污染的PCR
热心网友
时间：2024-08-17 04:35
普通PCR只用一对引物的。就是上游引物和下游引物。
你说的那个内引物和外引物实际是两对引物，巢式PCR采用的。
有没有做分子的朋友,请教一下一般的pcr扩增用一对引物就行了,
在第一轮扩增中，外引物用以产生扩增产物，此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。由于巢式PCR反应有两次PCR扩增，从而降低了扩增多个靶位点的可能性（因为与两套引物都互补的引物很少）增加了检测的敏感性；又有两对PCR引物与检测模板的配对，增加了检测的可靠性。一般应用于动物方面。如：病毒，梅毒...
pcr扩增需要几种引物
普通PCR需要正反向引物各一条，即一对引物，有些特殊PCR需要多条引物。pcr技术的基本原理类似于dna的自然复制过程，其特异性依赖于靶序列两端互补的寡核苷酸引物。pcr是一种体外dna扩增技术，它依赖于dna聚合酶在模板dna、引物和四种脱氧核苷酸存在下的酶促反应。待扩增的DNA片段及其两侧互补的寡核苷酸链引...
为什么扩增用一对引物,而测序要两对引物
一般扩增用一对引物就行了，然后在根据你扩出来片段的大小绝定要用几条引物进行测序！如果片段在1K左右需要2条引物测通！同时这2条用于测序的引物可以是扩增的引物，但并不是所以PCR引物都能用于测序，以下这些PCR引物不适合用作测序的：简并引物、随机引物，如RAPD引物、过长的引物（一般测序引物在18-...
pcr扩增为什么需要一对与錮na互补的引物
般引物根据实验需要设计与目基互补扩增产物部其PCR使用聚合酶没内切酶性切割扩增产物
pcR引物设计为什么要一对
PCR是扩增DNA来着，DNA是双链，在复制的时候两条链要同时复制的，所以一条链就要对应一条引物。而DNA聚合酶作用的方向是5’—3’，两条引物要分别和两条链的5’端互补配对的。
PCR时为什么要加一对引物,只加一对中的一条会有什么问题?
当只加入1条引物，PCR的扩增产物量不会多，因为当DNA双链解开，只有一条引物结合到模板链进行延伸，但是另一条链没有相应的引物扩增，体系中的双链不会新增。在进行逆转录实验时，只加入一条引物，利用反转录以一条DNA单链为模板,也即以一条引物为转录的起始。
测序pcr为什么只需要一条引物
可能是你的pcr比较短，一个测序反应就可以了，同时你没有要求测通，因为由于测序原理的原因，从测序引物开始的前几十个碱基是不准或者测不到的，所以如果想知道一个pcr的全部序列就需要一对引物进行双向测序，另一条引物可以是你的扩增引物也可是根据已测序列设计的反向引物。
为什么PCR扩增后分子量比全基因组小
PCR扩增使用了一对引物，识别的是整个全基因组上的一个片段，然后对这个识别了的片段进行重复的复制，所以最后你得到的产物是只有这个被你挑出来的片段和很小一部分杂片段（这点杂片段是正常存在的）你最后得到的当然分子量变小了啊，你可以百度视频里面去看下PCR的原理图，整个过程一看就明白了。
pcr扩增时,引物浓度一般需要多大?加多少?
那么我们通常是加入500 uL的水稀释 这个时候引物的浓度是10 umol/L 也就是你用的浓度 如果取1 uL引物的话 物质的量是 10 umol/L x 1 uL = 10 x 10的负6次方 umol = 10 pmol 一般而言25 uL的反应体系上下游引物各加入10 pmol，当然可以根据具体实验需要进行相应调整 关键就是看你一开始引物...
PCR时为什么要加一对引物,只加一对中的一条会有什么问题
回答：因为PCR第一步要95°加热使DNA变性得到两条单链作为PCR扩展的模板,模板序列不同,所以PCR时要加一对引物。只加一对中的一条扩展速度只有一半。
