为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗
发布网友
发布时间:2022-08-06 21:33
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热心网友
时间:2023-11-28 17:44
原因就是疏水性!前面说了疏水性就是抱团的个性。C18长链在纯水条件下会抱团,然后抱团之后就很难分开,然后柱子的柱效就下降了,因为C18里面被抱团在内部的那一部分就失去作用了,然后柱效就下降了。这个不是很容易恢复。
为什么加了有机相就可以了?因为有机相的甲醇或乙腈什么的,在C18抱团的时候会起到阻碍作用。所以加一定量的有机相在里面很重要
抱团作用(疏水性)和柱子本身有关:有的柱子很怕水的,曾经有一根旧的填料的柱子,工程师建议我水相最多不超过80%,说老填料不行。菲罗门的柱子一般建议95%的水,有那么一点点的有机相,就可以有效阻止抱团行为(这是少有的在说明书里面写出来冲洗用有机相比例的柱子)。这说明他们的填料里面有阻挡的基团了,5%足够的有机相就够。另外,碳载量高的柱子肯定怕水,因为C18多,容易抱团;碳载量低的相对不是很怕水。
热心网友
时间:2023-11-28 17:45
容易引起疏水坍塌,把强保留物质冲出来,会毁了柱子的,所以水相不能超过95%,最开始的梯度淋洗也是高有机相到高水相,但是不是纯水相。