在包涵体细胞的变性与复性中实验中,最有可能用到哪个
发布网友
发布时间:2022-08-04 21:12
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热心网友
时间:2024-11-18 21:42
您好!您这里可能有些概念错误。
① 包涵体就是蛋白的变性聚集后的产物,6M盐酸胍及8M尿素是作为溶解包涵体的溶剂。
② 复性的过程是逐步去除盐酸胍或者尿素,从而使得蛋白天然构象逐步形成。
所以一般如果起始使用的是6M盐酸胍进行包涵体溶解,这个过程中逐步降低的是盐酸胍的浓度。梯度离心或者差速离心去除细胞碎片,一般1000r/min左右就差不多可以达到效果。包涵体是表达过快的蛋白来不及折叠而形成的蛋白团,所以一般蛋白纯度能够达到95%以上,用6M盐酸胍就基本把包涵体分开,再超滤一下加上缓冲液就基本上很纯了