siRNA表达框架的方法有哪些缺点?

发布网友发布时间：2022-09-28 09:36

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热心网友时间：2024-12-05 17:43

siRNA表达框架方法的主要缺点是：①PCR产物很难转染到细胞中（晶赛公司的Protocol可以解决这一问题）；

②不能进行序列测定，PCR和DNA合成时可能差生的误读不能被发现导致结果不理想。

最适用于筛选siRNA序列，在克隆到载体前筛选最佳启动子，不适用于长期抑制研究（如果克隆到载体后就可以了）。此外还有编码shRNA的载体生产siRNA；病毒粒子生产shRNA等。

热心网友时间：2024-12-05 17:43

siRNA表达框架是利用含能表达siRNA分子的PCR产物，包括一个RNA polⅢ启动子，一段发夹结构siRNA，一个RNA pol III终止位点。无需克隆至载体即可导入细胞抑制特定基因的表达。但由于PCR产物较难转染到细胞中，也不能进行序列测定，会导致结果不理想且不能用于大规模和长期的抑制研究。