如何计算质粒的拷贝数(copies)?

发布网友发布时间：2022-04-23 09:20

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热心网友时间：2022-06-28 08:43

拷贝数计算公式：copies/ml（拷贝数）=(6.02 x 10(23)次拷贝数/摩尔) x (浓度) / (MW g/mol)。

细菌细胞中，某种特定质粒的数目。根据复制特性，质粒分严紧型和松弛型两类，前者在细胞中只含1～2个，而后者含10～15个以上。

恒定的拷贝数与质粒复制控制系统、宿主细胞遗传背景及生长条件有关。

质粒复制控制系统首先通过调节复制的起始点来控制拷贝数，调节因素包括阻遏蛋白、反义RNA和某些顺向重复序列。

有些质粒还有其他控制系统，如有分配功能的par系统和确保质粒稳定遗传的ccd系统。一旦质粒上与*有关的基因或位点突变，可使拷贝数明显增加或减少。

扩展资料

实时荧光定量PCR其定量的基本原理是在 PCR 反应体系中加入非特异性的荧光染料（如： SYBR GREEN I ）或特异性的荧光探针（如： Taqman 探针）。

实时检测荧光量的变化，获得不同样品达到一定的荧光信号（阈值）时所需的循环次数： CT 值（ Cycle Threshold ）；通过将已知浓度标准品的 CT 值与其浓度的对数绘制标准曲线，就可以准确定量样品的浓度。

荧光定量 PCR 技术具有简便、快捷的优点，能够有效扩增低拷贝的靶片段 DNA ，对每克样品中 20pg-10ng 的转基因成分进行有效检测。

同时，与 Southern 法相比，荧光定量 PCR 技术可对 T-DNA 的不同序列进行扩增，因此能实现对转基因品系中的基因重组的检测（ Giovanna 2002 ）。

参考资料来源：百度百科-拷贝数

热心网友时间：2022-06-28 08:43

MW 代表克/摩尔，单位dolton：1dolton即表示 1g/mol1 摩尔= 6.02 x 10(23)次摩尔分子(拷贝数)平均分子量（MW）:dsDNA=(碱基数) x (660 道尔顿/碱基)ssDNA=(碱基数) x (330 道尔顿/碱基)ssRNA=(碱基数) x (340 道尔顿/碱基)得到拷贝数计算公式:即：(6.02 x 10(23)) x (g/ml) / (DNA length x 660) = copies/ml.或(6.02 x 10(23)) x (ng/ul x 10(-9) ) / (DNA length x 660) = copies/ul.另外：这个网站可以直接输入质粒浓度直接得出copies。