基因编辑技术如CRISPR等,我只知道能切除特定基因,但他们的切除蛋白科学家是如何编辑让他们切除指定基因
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发布时间:2022-11-25 09:22
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热心网友
时间:2023-10-09 05:57
基因敲除:如果想使某个基因的功能丧失,可以在这个基因上产生DSB,非同源末端连接(NHEJ)修复的过程中往往会产生DNA的插入或删除(indel),造成移码突变,从而实现基因敲除。
特异突变引入:如果想把某个特异的突变引入到基因组上,需要通过同源重组来实现,这时候要提供一个含有特异突变同源模版。正常情况下同源重组效率非常低,而在这个位点产生DSB会极大的提高重组效率,从而实现特异突变的引入。定点转基因:与特异突变引入的原理一样,在同源模版中间加入一个转基因,这个转基因在DSB修复过程中会被拷贝到基因组中,从而实现定点转基因。通过定点转基因的方法可以把基因插入到人的基因组AAVS1位点,这个位点是一个开放位点,支持转基因长期稳定的表达,破坏这个位点对细胞没有不良影响,因此被广泛利用。
CRISPR-Cas9技术有两个组成部分。第一部分是一种叫做Cas9的酶,它的功能是作为细胞的刀来切割DNA(在自然界中,细胞利用它来分离并剔除入侵病毒的遗传基因代码) 。另一部分则是能精准引导这把“刀”到指定核苷酸的向导RNA,而该核苷酸便是要被分离的DNA的化学键。这一向导RNA准确得可怕,科学家们可以添加一个人造的替代品到基因染色体的任意位置,即使这个染色体由数十亿个核苷酸组成。当它到达其目的地时,Cas9酶会剪去多余的DNA序列。为了修补其破损,细胞会插入已经在CRISPR包中释放的核苷酸链。