菌落PCR技术鉴定阳性重组

发布网友发布时间：2022-11-10 18:21

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热心网友时间：2024-04-07 10:18

再答：

当一段外源基因插入载体序列中，这段外源基因的两端就是质粒的序列，对不对？所谓通用引物，就是以外源基因两端的质粒序列设计的引物，一般是用在测序当中的。
测序的时候，为了省事，就让测序公司用通用引物测序。所以，如果用通用引物测序，扩增的就是：上游质粒序列+外源基因+下游质粒序列

你这个问题问的蹊跷...
在pcr第一步高温变性的过程中,菌体就会破裂,释放出质粒,应该说此时大多是环状质粒,但是在接下来的反复变性,复性的过程里,难免会出现断裂的情况.

但是不管怎样,你是要鉴定阳性重组质粒,也就是说你扩增的是插入质粒序列中的外源基因,而且,你用的引物肯定是特异的.

所以,不管是环状还是线性,都没多大关系啊.