苏木精 伊红染色的注意事项
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发布时间:2022-04-22 11:03
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热心网友
时间:2023-10-16 20:19
染色时应注意事项
在进行HE染色时还应注意以下问题:
1.组织切片的脱蜡步骤应彻底,否则无论进行那种染色都会发生困难。脱蜡时间要充分,若溶蜡剂使用过久应及时更换以免效率降低,若室温过低,可将溶蜡剂置于温箱中进行脱蜡。
2.苏木素染液使用一段时间后表面易出现亮晶状飘浮物,这可能是液体表面的过氧化物,必须过滤除去,以防沉渣污染组织切片。苏木素液一般染过三、四百张切片后,着色力会减弱,着色不鲜艳,呈灰蓝色时应及时更换新液。
3.染色的时间长短需依据:染剂对组织的染色作用,室温条件,切片厚薄,固定液的类别,染液的新旧而进行调节。所以在染色时必须使用显微镜观察染色程度以利掌握时间。
4.分化十分重要。分化步骤的准确也是染色成败的关键,若分化失当则必然引起染色不匀或过淡,过深等现象,因此分化后一定要镜检,观察胞核是否清晰,胞浆呈淡白色。否则需再次分化,不然一旦复染后,组织会呈紫蓝色即“蓝盖红”现象。
5.还原液不宜过浓,若碱性太强易使组织脱落故以淡为宜。
6.伊红宜淡染,复染过深胞核会不清晰,影响镜检。
7.若脱水,透明等步骤不够彻底,则组织表面会有一层雾状膜。若有这一现象,应立即更换纯酒精脱水,再次透明。在潮湿的季节里应注意酒精的浓度、若降低要及时更换。
8.染色后的组织切片、要将组织四周的污染物痕迹擦掉,以免影响美观。
9.封固剂要适量,滴加时应小心倾滴,盖玻片要轻轻放置,以免气泡产生影响镜检。盖玻片大小选择要合适,一般要大于组织块,以防封盖不全,盖玻片要放正,标签贴牢,编号清楚。从而保证切片的封藏和美观。
10.染好的切片应妥为保存,更应避免日光照射,否则切片容易褪色。
热心网友
时间:2023-10-16 20:19
组织切片的脱蜡步骤应彻底,否则无论进行那种染色都会发生困难。脱蜡时间要充分,若溶蜡剂使用过久应及时更换以免效率降低,若室温过低,可将溶蜡剂置于温箱中进行脱蜡。
苏木精伊红染色的注意事项
1、组织切片的脱蜡步骤应彻底,否则无论进行那种染色都会发生困难。脱蜡时间要充分,若溶蜡剂使用过久应及时更换以免效率降低,若室温过低,可将溶蜡剂置于温箱中进行脱蜡;2、苏木素染液使用一段时间后表面易出现亮晶状飘浮物,这可能是液体表面的过氧化物,必须过滤除去,以防沉渣污染组织切片。苏木素...
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HE染色的步骤及注意事项
注意事项包括:确保脱蜡彻底、定期更换乙醇溶液、根据组织特性和染液新旧调整分化时间,以及使用安全的促蓝液和冷冻切片染色技巧。操作时务必遵循安全规范,如穿戴实验服和手套,并确保工作环境通风且远离火源。
HE染色的实验原理方法及注意事项
注意事项: 1. 染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长,组织酸化而影响细胞核着色。因此,要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min,这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳,可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。 2. 切片染苏木精后,分色...
he染色主要看什么东西?
注意事项 切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖。he染色对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。着色情况与组织或细胞的种类有关。切片在苏木素染液中停留过长;或切片太厚;或分化时间太短。
he染色的原理和意义
2、he染色的注意事项:切片脱水透明切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底,封片后呈白色雾状,镜下观察模糊不清,且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水,也可使用石炭酸二甲苯进行脱水。石炭酸有较强脱水能力,但长时间可使切片脱色,因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去...
he染色的具体步骤及原理
注意事项:1、染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长,组织酸化而影响细胞核着色。因此,要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min,这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳,可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染苏木精后,分色这一步是关键,...
he染色的操作步骤
染色环节是核心步骤,苏木精和伊红分别染细胞核和细胞质,呈现鲜明的对比色,便于观察细胞的形态和结构特征。最后通过封片使切片更加平整并增加其透明度,便于显微镜下的观察和分析。这种染色方法广泛应用于病理学、组织学等领域,为细胞的形态学研究提供了重要的技术支持。四、注意事项 操作过程中需注意样品的...
制作高质量染色切片,这些细节你要知道!
注意事项包括:1、脱蜡应彻底,避免影响染色效果。2、染色时间与染液的新旧程度有关,需根据实际情况调整。3、伊红染液的pH值需在3.6-4.7之间,避免与胞核染色体等电点相冲突。4、掌握好分化程度,及时终止分化,避免过度脱色。5、封固用的中性树胶浓度应适宜,避免气泡产生。6、脱蜡用二甲苯需定期...
苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法
1. 石蜡切片脱蜡至水:将切片依次放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、无水乙醇Ⅰ、无水乙醇Ⅱ、75%酒精中,每次浸泡5分钟,然后自来水冲洗。2. 苏木素染色:将切片放入苏木素染液中染色3-5分钟,随后自来水冲洗,使用分化液进行分化,再次自来水冲洗,最后用返蓝液进行返蓝,并流水冲洗。3. 伊红染色:将切片依次...
【实验步骤】HE染色——给细胞“上个色”
伊红染色细胞质,染色后同样要冲洗干净。脱水封片,经过多级乙醇和二甲苯的脱水,再用中性树胶封片。最后,通过显微镜观察并记录染色结果,如细胞核的蓝色、细胞质的粉红至桃红色等。实验过程中,有几点需要注意:脱蜡要彻底以确保染色均匀;苏木精染色时间受温度和成熟度影响,可能需要调整;染色后要彻底冲洗...