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怎样将平末端dna片段插入到EcoRI限制位点中去?

发布网友 发布时间:2022-04-22 09:21

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热心网友 时间:2023-09-17 06:36

如下:

第一种就是采用粘性末端连接的策略。通过在你的平末端目的片段两端分别加上含EcoRI和Xhol的酶切位点的接头序列,然后用这两种内切酶分别对目的片段和载体做双酶切,然后回收酶切后的载体和目的片段并连接。

第二种就是采用平末端连接的策略。直接将载体双酶切后然后用DNA聚合酶补平所产生的粘性末端,然后和目的片段直接进行平末端的连接。

介绍

DNA 分子结构中,两条多脱氧核苷酸链围绕一个共同的中心轴盘绕,构成双螺旋结构。脱氧核糖-磷酸链在螺旋结构的外面,碱基朝向里面。

两条多脱氧核苷酸链反向互补,通过碱基间的氢键形成的碱基配对相连,形成相当稳定的组合。

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