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提取的DNA测OD值是260/230小于1.7是什么原因

发布网友 发布时间:2022-08-24 15:44

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热心网友 时间:2023-11-09 15:59

比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品,A320一般是0。

A260/A280和A260/A230是核酸纯度的指示值。纯度好的DNA或RNA,在pH7-8.5下A260 / A280的比值应该在2.0 或2.5。

纯净的样品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物、盐(胍盐)等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0 。

当 0.5%BSA蛋白质污染时,蛋白污染会导致260和280的数值都下降,其净结果是260/280比值下降,但260/280的比值变化并不显著,正如分子克隆3所说。

但蛋白残留会导致230的数值显著上升,显著影响260/230的比值。也就是说,如果RNA样品的260/280=1.7,260 /230=0.5,那么就应该考虑污染原因不是胍盐残留,而是蛋白残留。

扩展资料

测DNA或RNA的OD值的含义:

范围内表示提取的DNA纯度较好,若小于1.7可能有蛋白污染,若大于2.0则说明有RNA污染或者DNA已经降解。260/230测的结果一般作为参考值,RNA提取时如果该值小于2说明裂解液中有异硫氰酸胍和巯基乙醇残留。

使DNA的纯度高,首先样品量合适,不能反复冻融,研磨时要充分,随时补充液氮,在样品未完全解冻前迅速加入裂解液中,后面的操作应尽量柔和,避免造成损伤。

RNA及DNA的提取,260/280测定用来鉴定DNA及RNA的纯度。260/280的值在1.8-2.0之间最好。

RNA 260/280<1.8说明有蛋白质、酚的污染,>2.0说明RNA降解。

DNA 260/280<1.8说明有蛋白质污染,>2.0说明RNA污染。

参考资料来源:百度百科-OD值

热心网友 时间:2023-11-09 16:00

A 260 / A 280 的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm。纯净的样品,比值大于 1.8(DNA)或者 2.0(RNA)。如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A 230 表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸 A 260 / A 230 的比值大于 2.0。A 320 检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品,A 320 一般是 0。(320差不多也就是那条曲线刚下降到0的时候)。
(转载,仅供参考)
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