[生物--选修模块1:生物技术实践]随着人类基因组计划的进展和多种生物基因组测序工作的完成,人类跨入了
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发布时间:2022-08-19 18:21
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时间:2023-10-26 07:46
Ⅰ、(1)红细胞的洗涤目的是去除杂蛋白,过程是将采集的血样低速短时间离心,吸出上层透明*血浆,再用五倍体积的生理盐水低速短时间离心重复洗涤三次.
(2)血红蛋白的释放:在蒸馏水和甲苯作用下,红细胞破裂释放出血红蛋白.
(3)分离血红蛋白溶液:试管中的溶液分为4层.第一层为无色透明的甲苯层,第2层为白色薄层固体,是脂溶性物质的沉淀层,第3层是红色透明液体,这是血红蛋白的水溶液,第4层是其他杂质的暗红色沉淀物.血红蛋白混合液在离心管中离心后,从上往下数第3层是红色透析液体即为血红蛋白的水溶液;
(4)透析:可以去除样品中分子量较小的杂质,或用于更换样品的缓冲液.
Ⅱ、透析后的样品还需经过凝胶色谱法进一步纯化,其目的是去除相对分子量较大的杂质蛋白.装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡在,这是因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果.
Ⅲ、判断纯化的蛋白质是否达到要求,可用电泳法对样品进行纯度鉴定,电泳是指带电离子在电场的作用下发生迁移的过程.
故答案为:Ⅰ将采集的血样低速短时间离心,吸出上层透明*血浆,再用五倍体积的生理盐水低速短时间离心重复洗涤三次 血红蛋白的释放 3
Ⅱ去除相对分子量较大的杂质蛋白 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果
Ⅲ纯度鉴定 带电离子在电场的作用下发生迁移的过程
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