组培实验小知识
发布网友
发布时间：2023-02-24 07:47
共1个回答
热心网友
时间：2023-12-23 04:06
外植体一般分为带芽外植体和分化组织构成的外植体两种，带芽的一般有茎尖、侧芽、原球茎、鳞芽等，可以通过添加生长素和细胞*素诱导出丛生芽；
分化组织构成的外植体有茎段、叶、根、花茎、花瓣、花萼、胚珠、果实、花粉等，这类一般是诱导出愈伤组织。
两类外植体一般优选带芽的容易培养成功。
外植体大小一般茎尖为0.1-0.5毫米，叶片和花瓣一般为0.5-1平方厘米，茎段一般0.5-1厘米
消毒灭菌步骤为：先用流水冲洗1小时左右，再用75%的酒精浸泡30秒，用无菌水冲洗3次左右，最后用0.1%升汞浸泡10分钟左右，用无菌水冲洗3-5次，然后再接种到配好的培养基上进行培养
2.植物组织培养的学习心得和设计一个实验..
植物组织培养技术是20世纪末植物学中发展起来的一种新技术。
它在植物细胞全能性学说的推动下，得到迅猛发展。近20多年来，我国植物组织培养在全国各地广泛开展。
它是指在无菌的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其增殖分化、生长、发育而形成完整的再生植株，即植物克隆。 植物组织培养一般分为以下几种： 1、胚胎培养 指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。
2、器官培养 指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养，如根的根尖和切段，茎的茎尖、茎节和切段，叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶，花器的花瓣、雄蕊（花药、花丝）、胚珠、子房、果实等的离体无菌培养。 3、组织培养 指以分离出植物各部位的组织（如分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮、皮层、胚乳组织、薄壁组织、髓部等），或已诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养。
这是狭义的植物组织培养。 4、细胞培养 指以单个游离细胞（如用果酸酶从组织中分离的体细胞，或花粉细胞，卵细胞）为接种体的离体无菌培养。
5、原生质体培养。 指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养。
植物组织培养的特点 1、培养条件可以人为控制 组织培养采用的植物材料完全是在人为提供的培养基和小气候环境条件下进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响，且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。 2、生长周期短，繁殖率高 植物组织培养是由于人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培养条件，因此生长较快。
另外，植株也比较小，往往20-30天为一个周期。所以，虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗，但由于植物材料能按几何级数繁殖生产，故总体来说成本低廉，且能及时提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。
3、管理方便，利于工厂化生产和自动化控制 植物组织培养是在一定的场所和环境下，人为提供一定的温度、光照、湿度、营养、激素等条件，极利于高度集约化和高密度工厂化生产，也利于自动化控制生产。它是未来农业工厂化育苗的发展方向。
它与盆栽、田间栽培等相比省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫等一系列繁杂劳动，可以大大节省人力、物力及田间种植所需要的土地。植物组织培养的优点： 1不受生长季节的* 2不携带病毒 3培养周期短 4可用组培中的愈伤组织支取特殊的生化制品 5可短时间大量繁殖，用于拯救濒危植物 6可诱导之分化成需要的器官，如根和芽 7解决有些植物产种子少或无的难题， 8不存在变异，可保持原母本的一切遗传特征 9投资少，经济效益高 10繁殖方式多，试用品种多开设植物组织培养课，可以使我们更多地了解生物技术发展的新动态、新技术、新方法。
在学习和掌握组培基本理论、基本技能的同时，提高观察能力、动手能力、独立思考的能力，学会发现问题、分析问题、解决问题；并通过学习这一生物技术，培养学习和关注生物科学的兴趣。 菊花是一种最为常见的并被人们所喜爱的花卉，与梅兰竹一起被称为岁寒四君子.它的栽培在我们由来已久，关于菊花的赞美之辞非常之多。
普通的栽培方法是用扦插等无性繁殖的手段，方法比较简单且成活率也高具体见 /news_view?id=865。
3.实验探究小杨是个爱动脑、爱动手的学生,课外时间喜欢做一些小实验
(1)有性生殖指的是两性生殖细胞 *** 和卵细胞结合形成受精卵的过程，由受精卵发育成新个体的生殖方式.无性生殖是不经生殖细胞的两两结合，由母体直接产生新个体的方式.从本质上讲，是由体细胞进行的繁殖就是无性生殖.主要种类包括：*生殖、孢子生殖、出芽生殖、营养生殖（嫁接、压条、扦插等）、组织培养和克隆等.植物用根、茎、叶等营养器官进行繁殖的方式叫做营养繁殖.人们经常将马铃薯的块茎切成小块来繁殖马铃薯.这种不经过两性生殖细胞的结合，由母体直接产生新个体的生殖方式叫做无性生殖.营养繁殖就是最常见的一种无性生殖的方式.（2）假设是对问题肯定与否定的回答，根据问题“马铃薯没有发芽是因为没有芽眼吗？”，可以假设：马铃薯块发芽的原因是受芽眼的影响.（3）对照实验是唯一变量实验，因此小刚将马铃薯块茎切成大小相等的小块的原因是控制变量（除变量外，其它条件都相同；单一变量等），因此本实验的变量应该是马铃薯的芽眼.（4）生物探究实验一般都是对照实验，小刚设置甲、乙两花盆的目的是形成对照实验.故答案为：（1）无性生殖（营养生殖）；（2）马铃薯块发芽的原因是受芽眼的影响；（3）马铃薯的芽眼；（4）形成对照实验.。
4.细胞培养的实验报告
原发布者：陈金利2031
细胞培养实验报告细胞培养主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存三个过程。1、实验仪器及用品（一）超净台：1.*头：10mL、5mL、1mL、200μL、10μL;2.移液*：同上，及相应的支架；3.离心管：50mL、15mL、1.5mL，及相应支架与盛皿；4.记号笔；5.PBS缓冲液；6.酒精棉；7.废液杯*2：一个装*头，一个装废液；8.封口膜；9.排*卡槽；（二）细胞间：1.离心机：中型、小型；2.培养瓶：透气的用于培养，密封的用于运输，培养皿；3.灭菌离心管、*头、冻存管等备用；4.毛巾、手套、口罩、酒精喷壶、灭菌超纯水、除菌滤膜；5.100μL排*；6.血球计数板、载玻片；7.水浴锅；（三）冰箱：1.双抗、环丙沙星；2.4℃：DMEM、1640、PBS、已配培养基；3.-20℃：MTT、MTS、DMSO、血清、胰酶；（四）缓冲间：1.CO2罐、液氮罐；（五）换衣间1.实验服、拖鞋、手套、口罩、酒精喷壶；二、实验前准备（一）实验前将需要带入的物品洗净、高温灭菌、喷酒精，放入传送窗，将传送窗与细胞间紫外开启杀菌半小时；（二）半小时后关闭紫外，开启风阀与空调，散去臭氧，双手用洗手液洗净擦干后进入换衣间，换上隔离服（若不使用超净台，换实验服即可），戴上口罩、手套喷酒精，进入缓冲间风浴1-3min；（三）进入细胞间，冰箱中取出所需溶液（胰酶、培养基等）置于超净台中，开启超净台紫外，关闭传送窗紫外，将物品取出后喷酒精后放于应处位置；注：若是冬天，溶液应在37℃水浴后再使用
5.胡萝卜组织培养实验
1、实验课题：胡萝卜的组织培养 2、课时数：5课时 3、实验材料用具：楼上说过了 一样 4、实验前的准备工作：配制两种培养基，对滤纸、解剖刀、烧杯、锥形瓶、培养基进行灭菌消毒 5、实验过程： 第一课时：①分析实验原理植物细胞的全能性，提问概念，分析讨论，激起学生的好奇心---一个细胞真的可以长成一个植物体吗？ ②设计实验，实验步骤可参看人教版选修三第34、35叶 ③学生动手操作，操作过程中，老师强调注意事项：植物组织培养的成败，关键是严格的无菌操作，如手的消毒、外植体的消毒、操作器具及培养基的消毒，并让学生思考为什么要控制严格的无菌条件？再让学生分析两种培养基的区别及培养条件的控制----脱分化的条件是，23—26度恒温避光，4天观察污染情况，14天观察愈伤组织的生长情况；再分化的条件是，分化培养基、有光等，然后学生做实验，在做实验的过程中，提高实验操作能力，体验相互合作意识。
第二、三、四、五课时：统计和分析实验结果，交流评价实验结果，分析实验操作过程，在此过程中，学生体验到成功的喜悦----“原来植物细胞真的长出了植物体，我通过实验实现了这种神奇的过程”，然后可以告诉学生，这些技术已经广泛应用到生产的各个领域，以拓展学生的知识领域。例如我们吃的香蕉的幼苗就是通过这种技术获得的，这样的香蕉植物与原来的香蕉相比，没有病毒，利于香蕉的生产。
6.谈培养的实验原理是什么
原理 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培 养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。
操作步骤 （一）胰酶消化法 1、器材：将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死，置75%酒精泡2—3秒钟（时间不能过长、以免酒精从口和 *** 浸入体内）再用碘酒消毒腹部，取胎鼠带 入超净台内（或将新生小鼠在超净台内）解剖取肝脏，置平皿中。 2、用Hank's液洗涤三次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。
3、用手术剪将肝脏剪成小块（1mm2），再用Hank's液洗三次，转移至小青霉素瓶中。 4、视组织块量加入5—6倍的0.25%胰酶液，37℃中消化20—40分钟，每隔5分钟振荡一次，或用吸管吹打一次，使细胞分离。
5、加入3—5ml培养液以终止胰酶消化作用（或加入胰酶抑制剂）。 6、静置5—10分钟，使未分散的组织块下沉，取悬液加入到离心管中。
7、1000rpm，离心10分钟，弃上清液。 8、加入Hank's液5ml，冲散细胞，再离心一次，弃上清液。
9、加入培养液l—2 ml（视细胞量），血球计数板计数。10、将细胞调整到5*105/ml左右，转移至25ml细胞培养瓶中，37℃下培养。
上述消化分离的方法是最基本的方法，在该方法的基础上，可进一步分离不同细胞。细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如 胶原酶，透明质酶等）。
（二）组织块直接培养法 自上方法第3步后，将组织块转移到培养瓶，贴附与瓶底面。翻转瓶底朝上，将培养液加至瓶中，培养液勿接触组织块。
入37℃静置3—5小时，轻 轻翻转培养瓶，使组织浸入培养液中（勿使组织漂起），37℃继续培养。
