Hepes缓冲液怎么配制
发布网友
发布时间：2022-04-29 20:01
共4个回答
热心网友
时间：2022-06-22 06:19
10mmol/L HEPES缓冲液配制方法如下：
准确称取HEPES 2.383g，加入新鲜三蒸水定容至1L。过滤除菌，分装后4℃保存（用于加入细胞培养液中作缓冲剂时，培养液需要避光保存）。
Hepes缓冲液的用途：对细胞无毒性作用。是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L，培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。
扩展资料
HEPES buffer缓冲溶液的配制方法：
一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制
119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至所需pH，然后用蒸馏水定容至500ml，于4摄氏度保存。
二、加少量盐的HEPES Buffer配方（500ml）
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值，最后定容。
注：HEPES的有效pH范围是6.8~8.2。
参考资料来源：百度百科-HEPES
热心网友
时间：2022-06-22 06:20
1、Hepes可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中，再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克Hepes，待溶后用lN NaOH调pH至7.2，滤过除菌后使用，此时Hepes的使用浓度为10mmol/L。
2、亦可配成100 x 贮存液（1mol/L），使用前取 99ml培养液加入 lml贮存液，最终应用浓度仍为10mmol/L。
3、1mol/L（100 x）HEPES贮存液配制方法：取23.8g Hepes溶于90ml双蒸水中，用lN NaOH调pH至7.5一8.0，然后用水定容至100ml，过滤除菌,分装小瓶（2ml/瓶），4℃或-20℃保存。
扩展资料
各种配制方法如下：
1、500ml 1 M Hepes，pH = 7.0 Stock solution的配制。
119.15 g Hepes 溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至所需pH（Hepes的有效pH 范围是6.8~8.2），然后用蒸馏水定容至500ml，于4摄氏度保存。
2、加少量盐的HEPES Buffer配方（500ml）。
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值，最后定容。
3、2×Hepes缓冲盐溶液的配制。
将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4、2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g Hepes溶解在90ml的蒸馏水，用0.5M NaOH调节至所需pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。
参考资料来源：百度百科-hepes
热心网友
时间：2022-06-22 06:20
中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸
分子式：C8H18N2O4S
HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。其最大优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值.在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中.大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙*,碱性培养液呈深红色.HEPES有些昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒. 原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的*.实际操作中并非如此简单. 溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。
HEPES使用方法有两种：
(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L.
(2)亦可配成 100 x 贮存液（l mol/L），使用前取 99ml培养液加入 lml贮存液，最终应用浓度仍为10mmol/L。l mol/L（100 x）HEPES贮存液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中,用lN NaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.
热心网友
时间：2022-06-22 06:21
