什么叫错配pcr 利用错配pcr增加抗体亲和力的主要原理是什么?

发布网友发布时间：2022-04-27 09:06

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热心网友时间：2023-05-30 09:53

列两篇相关文章的摘要,主要还是筛选抗体库.类似于进化论中的突变随机选择定向（如需要原文请提供电子邮箱）：
目的 :通过突变方法提高抗TNFα单链抗体pscTNF的亲和力.方法 :以pscTNF质粒为模板 ,应用错配PCR构建突变抗体库 ,筛选亲和力得到改善的变种 ,再以所获变种为模板 ,用交替延伸PCR技术 ,再次构建突变库 ,筛选活性得到改良的克隆.以斑点ELISA方法及硫氰酸盐洗脱ELISA法评估其亲和力的改善.结果 :从错配PCR抗体库中筛选得到 7个活性有所增强的变种 ,再通过交替延伸PCR使这 7个变种的突变位点交换重组 ,获得了亲和力进一步提高的克隆.结论 :联合应用错配PCR和交替延伸PCR法可提高单链抗体亲和力.
目的:采用错配PCR和DNA改组技术制备抗肝癌单链抗体.方法:联合采用错配PCR和DNA改组技术随机突变抗肝癌单链抗体A4-16重链和轻链可变区,构建抗肝癌噬菌体抗体次级突变库,利用噬菌体展示技术从中筛选出高亲和力单链抗体突变株.结果:抗肝癌噬菌体抗体次级突变库容为4·5×107,经过3轮富集筛选和ELISA鉴定获得2株突变株M25、M36,不仅保留原始克隆的特异性,而且相对亲和力指数分别为原始克隆的2倍和2·4倍.结论:错配PCR结合DNA改组技术是提高单链抗体亲和力的一种有效的手段.