什么是质粒克隆载体?
发布网友
发布时间:2022-04-20 04:32
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热心网友
时间:2023-07-06 19:37
克隆载体是能够通过*性内切酶,将目的DN*段整合进去,并且能够转入宿主细胞进行表达的生物DNA。
通常采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的外源DN*段,并注意不能破坏载体的自我复制性质.将重组后的载体引入到宿主细胞中,并在宿主细胞中大量繁殖.常见的载体有质粒,噬菌粒,酵母人工染色体。
对载体的要求:
①能在宿主细胞中复制繁殖,而且最好要有较高的自主复制能力.
②容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好.
③容易插入外来核酸片段,插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制.这就要求载体DNA上要有合适的*性核酸内切酶位点.
④容易从宿主细胞中分离纯化出来,
这才便于重组操作.
⑤有容易被识别筛选的标志,当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。
热心网友
时间:2023-07-06 19:37
条件应该是,与细胞质细胞核要有高度的关联融合性,否则细胞排斥会导致基因移植失败;性质在于,质粒拥有DNA,可以方便将目标基因导入质粒DNA,同时又可以在靶细胞得到表达。
热心网友
时间:2023-07-06 19:38
你好!
质粒需与细胞兼容,才能大量扩增。
带有酶切位点,才能让目的片段插入。
带有筛选基因,才能通过抗性或者蓝白筛选,或者致死基因筛选插入目的基因的成功克隆的载体。
仅代表个人观点,不喜勿喷,谢谢。
热心网友
时间:2023-07-06 19:38
1、具有复制起点
2、携带易于筛选的选择标记
3、具有多种*酶的单一识别位点,以供外源基因的插入
4、具有较小的相对分子质量和较高的拷贝数
5、有安全性